Diseño de cebadores en experimentos de ingeniería genética.

El nombre completo de CDS se refiere a la secuencia codificante. En el proceso de traducción natural, solo se traduce el CDS, lo que significa que el CDS de la mayoría de las proteínas comienza con AUG (codón de inicio, use ATG al diseñar cebadores) y termina con UAG, UAA, UGA (codón de parada, use TAG al diseñar cebadores), TAA, TGA) termina. ¿Diseñaste los cebadores para finalmente expresar esta proteasa? Si es así, simplemente diseñe los cebadores según CDS y puedo garantizar que no habrá ningún problema. Las secuencias ascendentes y descendentes de CDS son inútiles en la expresión de ingeniería genética. Compruebe si los cebadores diseñados por la empresa están diseñados desde ambos extremos del CD. Si el cebador anterior puede coincidir con las primeras 22 bases de CDS, significa que no hay problema con el cebador anterior.

Una cosa más a la que debes prestar atención es que si el vector de expresión que deseas expresar en el futuro utiliza una etiqueta HIS*6 para la purificación, debes verificar si hay una secuencia de terminación en el objetivo. fragmento amplificado por el cebador aguas abajo. Si es así, la etiqueta HIS*6 no se puede fusionar con su gen objetivo en expresiones posteriores, lo que significa que la proteína que expresa no se puede purificar mediante una columna de cromatografía de níquel.