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Soy estudiante de Inglés Biológico.
2.Experimental
2.1. Reactivos y Productos Químicos
Todos los productos químicos utilizados son resultados analíticos a menos que sean antiguos. El ácido acético, el acetonitrilo, el ácido ascórbico, el monohidrato de ácido cítrico, el protóxido (IV) y el fosfato disódico dihidrato se adquirieron de Merck (Darmstadt, Alemania). Se adquirieron hidróxido de amonio al 25 % (m/v), cloruro de metileno, metanol (calidad HPLC), acetato de sodio, perclorato de sodio monohidrato y ácido toluenosulfónico (p-TSA) de J.T. El verde brillante y el dihidrotritido de N, N, N9, N9 tetrametil 1,4 fenilendiamina (TMPD) se obtuvieron de Aldrich (Steinheim, Alemania), y el hierro cálcico se obtuvo de Acros (Geel, Bélgica). La dimetilformamida
se compró en Rathburn (Walkerburn, Reino Unido). Cardenillo verde incoloro hirviendo y ácido 1-pentanosulfónico
(sal sódica) entregado a Sigma (St. Louis, MO, EE. UU.) y oxalato de cardenillo verde hirviendo (Vetrenal)
Estándar de referencia) proporcionado por Riedelde Haen (Seelze, Alemania). Los cartuchos de extracción en fase sólida unidos a ácido sulfónico aromático (3 ml; 500 mg) se adquirieron de J. T. Baker. El agua era calidad Milli-Q (Millipore, Bedford, EE. UU.).
2.2. Dispositivo
Sarstedt suministra tubos de polipropileno con tapón de rosca (50 ml y 6 ml) (Numbrecht, Alemania). Utilizando un colector de vacío (J.T. Baker), la serie de columnas SPE se suministra con un adaptador de depósito de 75 ml, que también se procesa. Las muestras se secaron utilizando un colector de evaporación de Pierce (Rochford, IL, EE. UU.).
2.5. Cromatografía líquida-Espectrometría de masas-Análisis de espectrometría de masas
Para el análisis LC-MS-MS, inyecte alícuotas de 10 ml en un muestreador que incluya dos bombas HPLC (serie PE200, Applied Biosystems), autowas serie PE 200, Applied Biosystems) y sistema de cromatografía líquida de alto rendimiento con detector API-365 MS (Applied Biosystems). LC-MS-MS es el paquete de software Analyst (control de versión 1.1). La columna de cromatografía líquida de alta resolución es Phenomenx (guardia de seguridad C 18 4*2mm, Phenomenx) Luna C (5032 mm, Phenomenx, Torrance, USA) con columna de guarda. La fase móvil era una mezcla de acetato de amonio 50 mM (pH 4,4) y acetonitrilo (2:3, v/v) con un caudal de 200 ml/min. Antes de introducir el eluato en la cámara de ionización para la detección MS de los analitos, el efluente pasa a través de un reactor poscolumna y se llena con óxido de plomo (IV) y ferrita de calcio (consulte la Sección 2.4).
El MS está equipado con una interfaz ESI, el voltaje de funcionamiento es de +5500 V y el voltaje de ionización es.
Temperatura fuente 400±8C. Los potenciales de entrada, dispersión y foco se fijaron en 29, 40 y 180 V respectivamente. La espectrometría de masas en tándem se realizó mediante monitorización de reacciones múltiples (MRM). La energía de colisión (cerio) se optimiza para cada trayectoria de producción a medir. Se han detectado las siguientes trazas: m/z 329,3→m/z 165,0 (cerio 75 V), m/z 329,3→m/z 208,0 (cerio 55 V), m/z 329,3→m/z 313,3 (cerio 45 V ).
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