¿Cuál es la diferencia entre cromatografía de fase reversa y de fase normal?
Si se trata de fase invertida o fase normal depende de la polaridad de la fase móvil con respecto a la fase estacionaria. Si la fase móvil es más polar que la fase estacionaria, se llama cromatografía de fase inversa; si la fase móvil es menos polar que la fase estacionaria, se llama cromatografía de fase normal.
La fase móvil de la cromatografía de fase reversa es altamente polar y transporta fácilmente moléculas polares dejando atrás moléculas no polares. Se utiliza principalmente para la separación de muestras no polares. La cromatografía líquida de alta presión de uso común es de este tipo. A algunas personas también les gusta llamarla cromatografía líquida de fase reversa. De hecho, significa lo mismo, que es parecer más informado.
La fase estacionaria de la cromatografía en fase normal es altamente polar y retiene fácilmente moléculas polares, por lo que se utiliza principalmente para la separación de muestras polares. Como la cromatografía iónica.
En aplicaciones reales, parece que no prestamos mucha atención a la fase normal o a la fase invertida, pero sí a qué tipo de sustancias polares puede soportar la columna. No se puede utilizar agua pura altamente polar en columnas de cromatografía líquida de fase inversa. Se debe agregar al menos un 5 % de disolvente orgánico para debilitar la polaridad del agua. Las columnas de cromatografía iónica en fase normal no deben introducir sustancias orgánicas. Sin embargo, la cromatografía de gases es en realidad una cromatografía de fase normal, pero a menudo requiere que no pueda entrar agua.