Acerca del funcionamiento de la esterilización en laboratorio.
P: Necesito hacer algunos medios de cultivo recientemente. Es necesario filtrar y esterilizar algunos azúcares, pero no sé cómo hacerlo. ¿Qué equipo auxiliar se necesita?
Respuesta: Todo lo que necesita es una membrana filtrante y filtros adecuados. Generalmente se realiza en un banco de trabajo ultra limpio. La membrana filtrante está disponible en dos especificaciones: 0,22 micras o 0,45 micras, que se refiere al tamaño de los poros de la membrana filtrante. ¡Generalmente 0,22 es suficiente!
Respuesta: Si el volumen de la solución es relativamente grande y supera los 500 ml, puede utilizar previamente una botella filtrante esterilizada con una membrana filtrante de 0,22um. Antes de esterilizar el frasco con filtro de succión, verifique que el sello esté firmemente bloqueado con una gasa o algodón. Al usarlo, no es necesario hacerlo en una habitación esterilizada, siempre y cuando el frasco recolector esté en estado estéril. Después de la filtración por succión, la solución filtrada se vierte en una botella de reactivo vacía y esterilizada en condiciones estériles.
Si desea filtrar una pequeña cantidad de solución, puede utilizar una jeringa desechable y una membrana filtrante desechable de 0,22um (disponible en millipore o pall) en la sala estéril.
Respuesta: Depende de la cantidad de filtración. Si la cantidad es pequeña, use una jeringa para agregar un filtro y una membrana de filtro de 0,22 micras para filtrar. Después de agregar la membrana de filtro al filtro, cúbralo. Hervir agua destilada a 100 grados durante 30 minutos, aflójela ligeramente y selle la lonchera. Las botellas utilizadas para contener agua azucarada esterilizada requieren alta presión. Cuando lo use, opere en una mesa de operaciones estéril y apriete el filtro primero. Tenga en cuenta que incluso una gota que salga del filtro puede causar contaminación bacteriana. Si se siente fácil, la membrana del filtro se ha roto. La membrana filtrante de 0,45 micras se utiliza generalmente por primera vez en dos filtraciones para evitar obstrucciones de 0,22 micras. Sería mejor si la jeringa pudiera usar alta presión.
Si el volumen es grande, se puede utilizar una bomba peristáltica conectada a un tubo de cuero y un filtro de acero inoxidable con una membrana filtrante grande para presión positiva. Estos requieren alta presión. Se puede utilizar presión negativa para la filtración por succión.