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¿Qué es una sonda biológica?

Definición 1: Tipo de molécula marcadora utilizada para indicar las propiedades o el estado físico de sustancias específicas (como ácidos nucleicos, proteínas, estructuras celulares, etc.). ) en biología molecular y experimentos bioquímicos. Materia: Bioquímica y Biología Molecular.

Definición 2: Fragmento de ADN o ARN monocatenario marcado que se utiliza para detectar secuencias complementarias en hibridación molecular. Temas: Biología Celular, Genética.

Las sondas son fragmentos cortos de ADN o ARN monocatenario (aproximadamente de 20 a 500 pb) que se utilizan para detectar secuencias complementarias de ácidos nucleicos. El ADN de doble cadena se desnaturaliza calentándolo y luego se marca con un isótopo radiactivo (generalmente fósforo-32), un tinte fluorescente o una enzima (como la peroxidasa de rábano picante) para convertirlo en una sonda. El fósforo-32 normalmente se incorpora al grupo fosfato de uno de los cuatro nucleótidos que componen el ADN, mientras que los colorantes y enzimas fluorescentes, así como las secuencias de ácidos nucleicos, están marcados con *.

Cuando la sonda se hibrida con la muestra, la sonda y su secuencia de ácido nucleico complementario (ADN o ARN) se conectan estrechamente a través de enlaces de hidrógeno y luego el exceso de sonda sin hibridar se elimina por lavado. Finalmente, dependiendo del tipo de sonda, se pueden utilizar métodos como la autorradiografía, la microscopía de fluorescencia y la amplificación ligada a enzimas para determinar si la muestra contiene la secuencia que se está detectando (es decir, la secuencia complementaria a la sonda) y dónde.