¿Cuál es el principio de la desactivación del gen CRISPR Cas9?

Principio básico: los grupos CRISPR son una familia especial de secuencias repetidas de ADN que se encuentran ampliamente en los genomas de bacterias y arqueas. Su secuencia consta de una secuencia líder, varias secuencias repetidas cortas y altamente conservadas y varios espaciadores.

La región líder generalmente se encuentra aguas arriba del grupo CRISPR. Es una región rica en AT con una longitud de 300 ~ 500 BP y se considera la secuencia promotora del grupo CRISPR. La longitud de la región de secuencia repetida es de 21 a 48 pb, contiene palíndromos y puede formar una estructura en horquilla.

Las formas de tecnología de edición de genes son:

1. Recombinación homóloga

La recombinación homóloga es el método técnico más antiguo utilizado para editar genomas celulares. La recombinación homóloga es el intercambio (recombinación) de información genética entre dos cadenas de ADN similares (homólogas).

2. Nucleasa

La clave para la edición de genes es crear DSB en sitios específicos del genoma. Las endonucleasas de restricción utilizadas habitualmente son eficaces para cortar el ADN, pero normalmente reconocen y cortan en múltiples sitios y tienen poca especificidad. Para resolver este problema y crear DSB en un sitio específico.