Tengo verrugas genitales a los 19 años, ¿qué debo hacer?

Condiloma acuminado

Descripción general

Esta enfermedad también se llama verrugas genitales, verrugas genitales o verrugas venéreas. Es una enfermedad de transmisión sexual causada por la infección por el virus del papiloma humano (VPH). Hay muchos tipos de VPH. Los principales tipos que causan esta enfermedad son los tipos 1, 2, 6, 11, 16, 18, 31, 33 y 35. Entre ellos, la infección a largo plazo por los tipos 16 y 18 del VPH. relacionado con la aparición de cáncer de cuello uterino en las mujeres.

Diagnóstico

1. Historia de relaciones sexuales impuras.

2． Las lesiones cutáneas típicas incluyen pápulas, excrecencias carnosas papilares, en forma de coliflor o de peine en los genitales o en la zona perianal, con superficies rugosas y queratinizadas.

3． La prueba del blanco de ácido acético fue positiva y los cortes patológicos mostraron disqueratosis y células huecas.

4． La hibridación de ácidos nucleicos puede detectar secuencias relacionadas con el ADN del VPH y la detección por PCR puede revelar zonas específicas de amplificación del ADN del VPH.

Medidas de tratamiento

Dado que actualmente no existen fármacos antivirales específicos, el tratamiento de las verrugas genitales debe ser integral.

(1) Incentivos al tratamiento: (leucorrea excesiva, prepucio excesivo, gonorrea).

(2) Mejora la inmunidad del organismo.

(3) Aplicación de fármacos antienfermedades. Generalmente, se puede curar siempre que se siga un tratamiento integral regular.

1. Terapia quirúrgica

Los condilomas únicos y pequeños se pueden extirpar quirúrgicamente; para los condilomas acuminados grandes, se puede utilizar la cirugía de Mohs. Durante la operación, se utilizan secciones congeladas para comprobar si el daño se ha eliminado por completo.

2． Crioterapia

La crioterapia utiliza nitrógeno líquido a una temperatura baja de -196 °C para tratar el condiloma acuminado utilizando un método de congelación a presión para promover la necrosis y la eliminación del tejido de la verruga. Este método es adecuado para cantidades pequeñas y áreas pequeñas. Condiloma y se puede tratar en 1 o 2 veces, el intervalo es de una semana.

3． Tratamiento con láser

Normalmente se utiliza láser de CO2 para tratar las verrugas genitales mediante cauterización. Esta terapia es más adecuada para las verrugas genitales en la vulva, el pene o la zona perianal. Se pueden tratar una sola o una pequeña cantidad de verrugas genitales múltiples a la vez, mientras que las verrugas genitales múltiples o de área grande se pueden tratar en 2 o 3 veces, con un intervalo de una semana.

4． Tratamiento con electrocauterio

Utilización de electroacupuntura de alta frecuencia o electrocirugía para eliminar las verrugas genitales. Método: anestesia local, seguida de electrocauterización. Esta terapia es adecuada para un número reducido y áreas pequeñas de verrugas genitales.

5. Tratamiento con microondas

Utilizando una máquina de tratamiento quirúrgico con microondas y anestesia local con lidocaína, la punta de la sonda de radiación en forma de varilla se inserta en la punta afilada directamente a la base de la verruga. Se vuelve más pequeño, el color se vuelve más oscuro y el color cambia de suave a suave. Cuando está duro, se completa la solidificación por radiación térmica y se puede sacar la sonda. Las lesiones coaguladas se pueden eliminar con pinzas. Para evitar la recurrencia, la base restante se puede coagular nuevamente.

6. Tratamiento con rayos β

Hemos logrado resultados satisfactorios aplicando rayos β para tratar las verrugas genitales. Este método es altamente efectivo, indoloro, no dañino, tiene pocos efectos secundarios y tiene una baja tasa de recurrencia. Tiene valor de promoción clínica.

7. Terapia farmacológica

(1) Podoca oleifera: esta terapia es adecuada para las verrugas genitales en zonas húmedas, como las del glande y el perineo, donde el prepucio es demasiado largo y no ha sido circuncidado. Pero el condiloma acuminado cervical no se puede tratar con resina de podocarpo. Aplique tintura de mantequilla de podocarpus al 20% en las lesiones de la piel o antes de aplicar el medicamento, primero use un ungüento antibacteriano aceitoso para proteger la piel normal o las membranas mucosas alrededor de las lesiones de la piel y luego aplique el medicamento de 4 a 6 horas después de su uso, use el 30%. Agua con ácido bórico o Lave con agua y jabón y repita el medicamento después de 3 días si es necesario. Este medicamento es el primer medicamento que se usa para tratar esta enfermedad en el extranjero. Generalmente, se puede curar después de un uso. Sin embargo, tiene muchas desventajas, como ser muy destructivo para los tejidos y provocar úlceras locales si se usa incorrectamente. Es altamente tóxico y se manifiesta principalmente como náuseas, obstrucción intestinal, leucopenia y trombocitopenia, taquicardia, anuria u oliguria, por lo que debe usarse con precaución si se descubren las reacciones anteriores, se debe suspender el medicamento inmediatamente.

(2) Medicamentos antivirales: se puede utilizar crema de ftalamida al 5% o pomada neta contra herpes al 0,25%, 2 veces al día, para aplicación externa. El aciclovir se toma por vía oral, 5 veces al día, 200 mg cada vez, o su pomada se usa externamente, y el interferón α se inyecta diariamente en 3 millones de unidades, cinco días a la semana. O inyectar 3 millones de unidades de interferón en la base de la verruga, dos veces por semana. Cuando se usa continuamente durante 2 a 3 semanas, el principal efecto secundario es el síndrome similar a la influenza y los efectos secundarios de la medicación tópica son menos frecuentes y leves.

(3) Corrosivos o desinfectantes: comúnmente se utilizan ácido tricloroacético al 30%-50% o ácido dicloroacético saturado, o ácido peracético al 18%. Utilice una solución mixta de 100 ml de ácido acético glacial de ácido salicílico al 10% o formaldehído al 40%, fenol licuado al 2% y agua destilada con etanol al 75%, y aplíquela localmente en el glande y el condiloma perianal una vez al día o en días alternos. El efecto es muy bueno. El desinfectante se puede aplicar externamente con tintura de yodo al 20%, o inyectarse en la base de la verruga con tintura de yodo al 2,5-5%, 0,1-1,5 ml cada vez, o aplicarse externamente con clormetionato o 0,1-0,2%, este último debe ser combinado con terapia sistémica.

(4) Medicamentos anticancerígenos

① 5-fluorouracilo (5-F u): Generalmente se utiliza de forma externa un ungüento o crema al 5%, dos veces al día, durante 3 semanas Un curso de tratamiento. La compresa húmeda de fluorouracilo al 2,5% ~ 5% se usa para tratar las verrugas genitales en el pene y el área perianal. La aplicación se aplica durante 20 minutos cada vez, una vez al día, y 6 veces es un ciclo de tratamiento. También se puede usar polietilenglicol como base, y se puede agregar polvo de 5-FU que representa el 5% de la materia seca para hacer un supositorio para tratar los condilomas acuminados en la uretra de hombres y mujeres. El 5-FU también se puede inyectar de forma basal. y se pueden inyectar más en lotes.

② Tiotepa: Se utiliza principalmente para condilomas acuminados intrauretrales que no han podido ser tratados con 5-FU. También se pueden utilizar óvulos (cada uno con 15 mg) diariamente durante 8 días. Se agregan 10 a 15 ml de agua desinfectante en la uretra cada semana y se mantienen durante media hora. Los efectos secundarios incluyen uretritis. También puede agregar 10 mg de este producto a 10 ml y remojar el área afectada 3 veces al día durante media hora cada vez para tratar el condiloma del pene y el surco coronal del glande. Se usa principalmente para quienes tienen verrugas residuales o recaídas. después del tratamiento con otros métodos. Esta solución también se puede diluir dos veces y remojar localmente para evitar que vuelva a aparecer.

③ Colchicina: se puede aplicar solución salina normal al 2-8% de forma externa, dos veces con 72 horas de diferencia para tratar las verrugas genitales del pene. Puede producirse erosión superficial después de la aplicación.

④ Zhengguangmicina o pingyangmicina: inyecte una solución salina normal al 0,1% en la lesión cutánea. La cantidad total se limita a 1 ml (1 mg) cada vez. La mayoría de las lesiones se pueden curar en una sola visita. La pingyangmicina es un sustituto de la zhengguangmicina y su uso es básicamente el mismo. También se pueden utilizar 10 mg de pingyangmicina disueltos en 20 ml de procaína al 10% para inyección.

8. Inmunoterapia

① Método de vacuna autóloga: utilice el homogeneizado de tejido de la verruga del propio paciente (fundiéndolo y enfriándolo para inactivar el virus) y caliéntelo (56 °C durante una hora) para recoger el sobrenadante para la inyección. Ser utilizado para el condiloma perianal sexual persistente.

② Inductor de interferón: se puede utilizar polimiosina y tirolona. Inyecte 2 ml de polimiosina todos los días durante 10 días. Después de suspender el medicamento durante 1 a 2 meses, continúe con el medicamento. La tirolona se toma 300 mg tres veces al día, con un descanso de 4 días, o 600 mg por vía oral en días alternos.

③ La aplicación combinada de interferón, interleucina Ⅱ, prodizocina y Libato tiene mejor eficacia.

Etiología

El VPH causa verrugas en la piel y lesiones proliferativas en la faringe, mucosa perianal y genital. Su tipo viral es un pequeño virus de ADN. La mayoría de las lesiones causadas por la infección por VPH son benignas y pueden resolverse por sí solas, pero también hay casos que empeoran. Por ejemplo, hay informes de formación de carcinoma de células escamosas en la mucosa perianal y genital. También existen enfermedades cutáneas hereditarias raras, cáncer de piel secundario a epidermodisplasia verruciforme (EV), etc. Se ha detectado VPH en células cancerosas.

El VPH es un miembro del género A de la familia Papovaviridae. La partícula del virus tiene un diámetro de 50-55 nm y está compuesta por un icosaedro regular sin membrana. Está compuesto por un ADN bicatenario circular. de 7900 pares de bases. Microscopía electrónica. El tamaño y la forma de las partículas del virus son muy similares a los del poliomavirus oral. El virus del papiloma (PV) es específico de cada especie y el VPH no se ha propagado en cultivos de tejidos ni en modelos animales experimentales.

La composición proteica estructural del virus: 85% de partículas PV, la electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) puede determinar que el virus tiene una proteína de la cápside principal con un peso molecular de 56.000 Menor; proteína de la cápside, el peso molecular cambió a 76.000 y se encontró que cuatro histonas celulares estaban relacionadas con el ADN viral.

La estructura genómica de todos los virus del VPH es similar. El tipo y subtipo del virus se puede determinar según el procedimiento de hibridación del ADN en condiciones estrictas. Sólo el 50% del ADN de los diferentes tipos de VPH se hibrida de forma cruzada. Con el ADN de otros tipos de virus, hasta el momento se han descubierto más de 60 tipos de VPH y, a medida que se profundicen las investigaciones, se identificarán más tipos nuevos de VPH.

Patogenia

La infección por VPH de las verrugas genitales se transmite a través del contacto sexual. Pequeñas heridas en el lugar de contacto pueden promover la infección. Tres tipos de epitelio escamoso (piel, mucosas, metaplasia). las infecciones son susceptibles. Cada tipo de VPH se asocia con un daño clínico específico y tiene sus propios sitios de predilección en la piel o el epitelio escamoso de la mucosa. La infección puede ocurrir cuando células superficiales exfoliadas o fragmentos de queratina que contienen una cantidad relativamente grande de partículas virales ingresan en las grietas del epitelio susceptible. Puede ser causada por contacto directo o, rara vez, por inoculación automática o ropa interior, bañeras, toallas de baño y orinales contaminados.

Después de que el virus infecta el cuerpo humano, puede acechar entre los queratinocitos basales y replicarse en la capa de células epidérmicas. El VPH invade el núcleo celular y hace que las células se dividan rápidamente. la reproducción y diseminación de partículas virales, formando papilomas característicos. Expresión genética tardía de polipéptidos estructurales, es decir, aparición de partículas de ensamblaje de proteínas estructurales, el virus se concentra principalmente en el núcleo en la capa granular y también aparece un aumento de células huecas en la capa granular de la epidermis. Tener VPH y ADN residual después del tratamiento a menudo puede provocar una recurrencia de la enfermedad.

La respuesta inmune del huésped a la infección por VPH incluye tanto inmunidad celular como inmunidad humoral.

1. Inmunidad celular

El estado inmunológico celular del cuerpo humano es uno de los fundamentos importantes que afecta la aparición y el resultado de la CA. La inmunidad celular es más importante que la inmunidad humoral. Clínicamente, los pacientes con condiloma acuminado con inmunodeficiencia celular a menudo presentan erupciones cutáneas persistentes, un aumento en el número de células T inhibidoras en la sangre periférica, una función baja de las células NK y una disminución en la producción de interferón r e interleucina 2. mientras que las lesiones cutáneas de las verrugas a menudo desaparecen. Se produjo una infiltración de células T activadas y células NK, y algunos queratinocitos fueron positivos para HLA-DR.

La incidencia de infección genital por VPH y enfermedades relacionadas con el VPH aumenta cuando el paciente está inmunodeprimido o inmunodeficiente. Las células T colaboradoras se agotan en las verrugas genitales y la proporción CD4/CD8 está invertida, con un valor <1. En la sangre periférica de pacientes con CA, se encontró que el porcentaje de células T supresoras/citotóxicas aumentó significativamente, y la proporción de células T auxiliares/inductoras y la proporción de células T auxiliares/supresoras disminuyeron. Las células de Langerhans se redujeron significativamente en las lesiones de CA cervical y neoplasia intraepitelial cervical (NIC). Se reduce la producción de interferón r e interleucina-2 por las células NK en CA. La actividad lítica de las células NK contra los queratinocitos que contienen VPH-16 se reduce en pacientes con papulosis bowenoide y cáncer anogenital, lo que puede deberse a un defecto en el reconocimiento de las células diana específicas de la enfermedad. Los queratinocitos de CA cervical no expresan el antígeno tipo MHCⅡ. (HLA-DR), la ausencia de esta función de presentación de antígenos puede destruir la función de vigilancia inmune.

2. Inmunidad humoral

Los resultados de las pruebas serológicas actuales muestran: ①La tasa de producción de anticuerpos anti-proteína tardía es del 25% al ​​65%, que es mayor que la tasa de producción de anti-proteínas tardías. -anticuerpos proteicos tempranos; ②Detección Los anticuerpos contra el VPH producidos parecen ser de tipo específico y no tienen reactividad cruzada; ③ los anticuerpos anti-VPH-16E7 están estrechamente relacionados con la existencia de cáncer de cuello uterino; ④ los anticuerpos anti-VPH-16E4 también son un signo de cáncer de cuello uterino, recurrencia o infección reciente por VPH ⑤ estimada La tasa positiva de anticuerpos IgG producidos por adultos y niños es la misma, y ​​​​las tasas positivas de diferentes tipos oscilan entre el 10% y el 75% ⑥ Se ha demostrado que solo; Se pueden detectar anticuerpos entre el 50% y el 70% de los pacientes que son positivos para VPH-16 o anticuerpos tumorales tipo 18.

3. Regresión natural de las verrugas genitales

No existe una evaluación sistemática de la regresión natural de la CA. Sin embargo, estudios controlados con placebo han encontrado que las tasas de regresión natural son del 0%. 17%, 18% y Entre 69% y 69%, después de que la CA se resuelve o se cura, el 45% de los pacientes todavía tienen infección latente y el 67% de estos pacientes recaen.

Epidemiología

1. Situación epidémica

Los condilomas acuminados son causados ​​por el virus del papiloma humano. Actualmente se coincide en que esta enfermedad está aumentando y se ha convertido en la enfermedad más común entre las ETS, con una prevalencia del 0,5%-1% en adultos jóvenes. La incidencia de verrugas genitales en el Reino Unido aumentó de 30/100.000 en 1970 a 260/100.000 en 1988, un aumento de casi 8 veces. La incidencia de verrugas genitales en los Estados Unidos aumentó 6 veces entre 1966 y 1984. Al igual que el SIDA, las verrugas genitales sintomáticas sólo representan la cima del "iceberg" de personas infectadas, por lo que si se tienen en cuenta las infecciones subclínicas, la infección por el virus del papiloma humano puede ser la ETS más común en términos de incidencia.

Los métodos de transmisión de la infección incluyen la transmisión directa e indirecta, pero el contacto sexual es el más común y cuanto más reciente es el daño, más contagioso es. Se estima que existe un 50% de posibilidades de infección por contacto único; por contacto directo no sexual, como infección autóloga e infección neonatal a través del canal del parto; en segundo lugar, se especula que es posible el contacto indirecto, la infección por contaminación, pero el virus no se puede cultivar ni confirmar.

2. Factores de riesgo de las verrugas genitales

(1) Comportamiento sexual: El número de parejas sexuales y las relaciones sexuales prematuras son factores que provocan la infección por VPH.

(2) Inmunosupresión: la infección por VPH y los cánceres relacionados con el VPH parecen ser complicaciones tardías de la supresión inmune crónica. El riesgo de CA aumenta en los receptores de aloinjertos renales.

(3) Infección por VIH: las personas VIH positivas tienen una mayor probabilidad de desarrollar infección por VPH y tumores relacionados con el VPH.

(4) Edad, embarazo: La prevalencia máxima del VPH detectado en frotis ginecológicos es entre los 20 y los 40 años, a medida que aumenta la edad, la prevalencia disminuye de manera constante, la tasa de detección del VPH durante el embarazo es alta. la tasa de detección del VPH disminuye después del parto.

Manifestaciones clínicas

El período de incubación es de 3 semanas a 8 meses, con un promedio de 3 meses. Es más común en hombres y mujeres jóvenes y de mediana edad sexualmente activos. La edad máxima de aparición es entre 20 y 25 años y el curso de la enfermedad es promedio. Los pacientes masculinos y femeninos que tienen entre 3 y 5 meses desarrollarán la enfermedad poco después del contacto sexual, mientras que los pacientes masculinos con un curso promedio de la enfermedad. A los 12 meses no se puede desarrollar la enfermedad después del contacto sexual. La mayoría de los pacientes son generalmente asintomáticos. El daño varía en tamaño y forma. Pueden ser sólo unas pocas, o pueden ser una gran cantidad de lesiones en forma de agujas: puede crecer hasta convertirse en un gran objeto parecido a un tumor en la vulva y el ano, con una sensación de presión y un olor fétido, a veces pequeñas verrugas genitales; puede causar dolor, picazón y malestar en la vulva, y la paciente puede experimentar sangre en la orina y dificultad para orinar; las verrugas genitales en el recto pueden causar dolor y heces con sangre, mientras que las verrugas genitales grandes en el recto pueden causar tenesmo.

Los pacientes masculinos tienden a presentarse en el frenillo, surco coronal, prepucio, uretra, pene, alrededor del ano y escroto. La enfermedad aparece inicialmente como excrecencias en forma de mijo de color rojo claro o rojo sucio, que son de naturaleza blanda y ligeramente puntiagudas en la parte superior, y que gradualmente crecen o aumentan en número. Puede desarrollar una forma papilar o quística, con una base ligeramente más ancha o bandas y partículas en la superficie. El ano a menudo se agranda y parece una coliflor. La superficie está húmeda o sangra. A menudo se acumula pus entre las partículas y emite un olor desagradable después de rascarse. Las verrugas genitales ubicadas en áreas secas con poca humedad suelen tener lesiones pequeñas y planas parecidas a verrugas. Las verrugas ubicadas en áreas cálidas y húmedas a menudo parecen filamentosas o parecidas a papilomas y tienden a fusionarse en grandes masas. Las verrugas genitales pueden aumentar de tamaño en pacientes con enfermedad hepática grave. El embarazo puede hacer que las verrugas genitales reaparezcan o crezcan más rápido.

La infección subclínica se refiere a lesiones que no pueden reconocerse clínicamente a simple vista. Sin embargo, la aplicación local de una solución de ácido acético al 3%-5% o una compresa húmeda durante 5 a 10 minutos puede hacer que el área infectada por el VPH. blanco, que es el llamado “fenómeno de blanqueamiento acético”.

Infección por VPH y aparición de tumores:

(1) El VPH está relacionado con la aparición de tumores de piel

Parece desempeñar un papel en el cáncer de piel y los tumores en otras partes anatómicas tienen un papel decisivo. Crecimientos benignos y lesiones precancerosas en la cavidad oral, el ADN de los VPH-11, 16 y 18 se pueden encontrar en el tejido del carcinoma de células escamosas de la piel, se ha informado que los papilomas laríngeos del VPH-6 se transforman malignamente en cáncer de laringe y displasia epidérmica verrugosa de la piel ( EV) es evidencia del posible efecto cancerígeno del VPH. Se encontraron múltiples tipos de ADN de VPH en lesiones cutáneas de EV, y se detectaron VPH-5, 8, 14, 17 y 20 en pacientes con carcinoma cutáneo de células escamosas. una transformación maligna de un daño viral preexistente.

(2) Verrugas genitales y cáncer anogenital

Existe una cierta relación entre el cáncer genital y los tipos de VPH. Se utilizó tecnología de hibridación de ADN para descubrir la presencia de VPH-6, 11, 16, 18, etc. en tejidos de cáncer genital.

1． Cáncer de cuello uterino: según la relación entre el VPH y el cáncer de cuello uterino, se puede dividir en dos tipos: el tipo de bajo riesgo se refiere principalmente a los tipos de VPH-6 y 11, y el tipo de alto riesgo se refiere a los tipos de VPH-16 y 18. et al. observaron que en el cáncer de cuello uterino invasivo, el 57,4% de las pacientes tienen los tipos VPH-16 y 18, y otros estudiosos también han encontrado lo mismo. También se han aislado los tipos VPH-33 y 35 del cáncer de cuello uterino invasivo.

2. Carcinoma cutáneo de células escamosas (CCE): la CA que surge de la infección por VPH también puede ser una lesión precancerosa y puede convertirse en CCE anogenital, lo que indica que el VPH es un factor importante en el CCE vulvar, peniano y anogenital.

La CA, la CA gigante y el CCE verrugoso constituyen un espectro de lesiones precancerosas genitales y cáncer. En algunos casos de cáncer genital, la CA está presente en la piel circundante. A veces se observa como una CA típica a simple vista, pero el CCE se encuentra en el estudio histológico. examen. Lesiones aisladas.

3. Papulosis bowenoide: se encuentra comúnmente alrededor del pene, la vulva o el ano, y se ha encontrado ADN del VPH-16 en las lesiones.

Examen auxiliar

1. Prueba de blanqueamiento con ácido acético

Aplique ácido acético al 3-5% durante 2-5 minutos. La lesión se volverá blanca. y las lesiones anales ligeramente elevadas pueden tardar hasta 15 minutos. El principio de esta prueba es que la proteína y el ácido se coagulan y se vuelven blancos. La queratina producida por las células infectadas por el VPH es diferente de la producida por las células epiteliales normales no infectadas. Sólo las primeras pueden decolorarse con ácido acético. La prueba del blanco de ácido acético tiene una alta sensibilidad para detectar el VPH y es mejor que las pruebas convencionales para observar cambios histológicos. Sin embargo, ocasionalmente aparecen falsos positivos en casos de engrosamiento epitelial o abrasión traumática, y los signos de blanqueamiento falsos positivos aparecen poco claros e irregulares. Los CDC de EE.UU. recuerdan que la prueba del blanco de ácido acético no es una prueba específica y los falsos positivos son habituales.

2. Examen inmunohistológico

El método de peroxidasa-antiperoxidasa (PAP) se usa comúnmente para mostrar proteínas virales en las verrugas genitales para demostrar que hay virus en las lesiones de las verrugas. . Cuando la proteína del VPH es positiva, puede aparecer una reacción positiva débil de color rojo claro en las células epiteliales superficiales de las verrugas genitales.

3. Examen histoquímico

Tomar una pequeña cantidad de tejido dañado para hacer un frotis y teñirlo con anticuerpos específicos contra el virus del papiloma humano. Si hay un antígeno viral en la lesión, se combinará antígeno-anticuerpo. En el método de peroxidasa-antiperoxidasa (PAP), los núcleos pueden teñirse de rojo. Este método es muy específico y rápido, y resulta útil para el diagnóstico.

IV.Examen patológico

Los síntomas principales son paraqueratosis, hipertrofia de la capa espinosa, hiperplasia papilomatosa, engrosamiento y alargamiento de los procesos epidérmicos, y el grado de hiperplasia puede ser similar al pseudoepitelioma. . Muestra. Las células urticantes y las células basales también tienen un número considerable de divisiones nucleares, lo que es bastante similar al cáncer. Sin embargo, las células están dispuestas de forma regular y el límite entre el epitelio hiperplásico y la dermis es claro. Se caracteriza por una evidente formación de vacuolas en las células superiores de la capa granulosa y la capa espinosa. Este tipo de células vacuoladas son más grandes de lo normal, con citoplasma pálido y un núcleo grande, redondo y profundamente basófilo en el centro. Por lo general hay edema dérmico, telangiectasia y un denso infiltrado inflamatorio crónico circundante. Condiloma acuminado gigante de Bushke-loewenstein, la epidermis crece extremadamente hacia abajo, reemplazando el tejido subyacente y se mezcla fácilmente con células escamosas, por lo que se requieren múltiples biopsias. Si tiende a desarrollarse lentamente, se trata de un proceso maligno de bajo grado, que es el llamado cáncer verrugoso.

5. Diagnóstico Genético

Hasta la fecha, el VPH es difícil de detectar mediante cultivo viral tradicional y técnicas serológicas. La principal técnica de diagnóstico experimental es la hibridación de ácidos nucleicos. Los métodos de PCR desarrollados en los últimos años tienen las ventajas de especificidad, sensibilidad, simplicidad y rapidez, lo que abre nuevas vías para la detección del VPH.

(1) Recolección y procesamiento de especímenes

1. Recolección y procesamiento previo de muestras: use un raspador o un hisopo de algodón empapado en solución salina para recolectar secreciones y células de la vagina y el orificio cervical externo. Mientras realiza el examen citológico, coloque la muestra en 5 ml de PBS que contenga timerosal al 0,05%, lávela dos veces con PBS (3000 g, 10 min) y resuspenda las células sedimentadas en 1 ml de PBS. Tome 0,5 ml de la suspensión celular para extraer. ADN.

2． Extracción de ácido nucleico de muestra: agregue 1 volumen de suspensión celular a 10 veces el volumen de tampón de lisis celular (Tris-HCl 10 mmol/l, pH 7,4, EDTA 10 mmol/l, NaCl 150 mmol/l, SDS al 0,4 %, 1,0 mg/ml proteinasa K) a 37°C durante la noche; extraer con volúmenes iguales de fenol/cloroformo (1:1) y cloroformo/alcohol isoamílico (24:1) dos veces cada uno; agregar 1/10 de volumen de 3 mol/l de NaAc (pH 5,2); 2.5 Precipite el ADN colocando el doble del volumen de etanol absoluto a -20 °C durante 2 horas o durante la noche; agregue 1 volumen de etanol y lave una vez; use 60 µl de solución TE (Tris-HCl 10 mmol/l, pH 8,0, 1,0); mmol/ml) que contiene RNasa (100 μg/ml) EDTA) para disolver el ADN e incubar a 37°C durante 30 minutos.

(2) Amplificación por PCR

1. Diseño y síntesis de cebadores: el genoma del VPH se puede dividir en una región temprana (E) y una región tardía (L), cada región contiene una serie de marcos de lectura abiertos (ORF). El análisis de secuencia muestra que todos los tipos de VPH tienen secuencias conservadas en las regiones no codificantes y en las regiones E1, E6, E7 y L1. Manos et al. seleccionaron secuencias conservadas de la región HPVL1 para diseñar y sintetizar los cebadores MY11 y MY09, como se muestra en la Tabla 1. Los cebadores tienen secuencias complementarias a los tipos de HPV 6, 11, 16, 18 y 33, y también pueden amplificar otros tipos. del VPH.

2. Reactivos de reacción de PCR: ADN polimerasa Taq (2U/ml), solución madre de dNTP de 10 mmol/l (10 mmol/l de cada uno de dATP, dCTP, dGTP y dTTP), tampón de PCR 10 × (500 mmol/l de KCl, 40 mmol/l de MgCl2, 100 mmol/l). L Tris-HCl, pH 8,5), soluciones madre de 100 μmol/L MY11 y MY09, agua destilada preparada en un alambique de vidrio esterilizado.

3. Método y procedimiento de amplificación por PCR: Utilice 100 μl de solución de reacción de PCR y utilice un tubo de centrífuga de plástico siliconado estéril de 0,5 ml como tubo de reacción para realizar la reacción de amplificación.

(1) Prepare los reactivos de reacción premezclados antes del experimento y tome alícuotas. Los reactivos de reacción premezclados incluyen otros reactivos de reacción de PCR excepto el ADN de muestra.

(2) Agregue 10 μl de muestra y 90 μl de reactivo de reacción premezclado a cada tubo de reacción en secuencia.

(3) Agregue 80-100 μl de aceite de parafina y centrifugue rápidamente en una centrífuga de escritorio durante unos segundos para recoger cada reactivo de reacción debajo de la capa de aceite. Actualmente se comercializan reactivos de PCR y el volumen de reacción es de 25 μl. Solo agregue muestra de ADN cuando lo use.

(4) Coloque el tubo de reacción en el amplificador de PCR. Los parámetros del ciclo son 95 °C durante 30 s, 55 °C durante 40 s y 72 °C durante 50 s durante 35 veces, y finalmente extiende a 72. ºC durante 5 minutos.

4. Cada prueba debe tener controles positivos y negativos. Utilice plásmido recombinante que contiene VPH (100 pg por reacción) o ADN de línea celular que contenga VPH (como Caski, HeLa) como control positivo, y utilice ADN de línea celular humana libre de VPH como control negativo.

(3) Detección y análisis de productos de amplificación

1. Electroforesis en gel: después de la reacción de amplificación, saque el tubo de reacción y enfríelo a temperatura ambiente. Tome 10 µl del producto de amplificación y páselo por gel de poliacrilamida al 5%-7% o electroforesis de agarosa al 1,5%, tiñe con bromuro de etidio y. Utilice un analizador UV. Los siguientes resultados del análisis muestran que hay una banda de ADN obvia con un peso molecular de aproximadamente 450 pb.

2. Hibridación de ácidos nucleicos: si no hay ADN claro en la electroforesis en gel o es necesario determinar la especificidad de la banda de ADN, se pueden usar sondas mixtas públicas marcadas y/o sondas de tipo específico para la hibridación por transferencia Southern y la verificación de la hibridación puntual.

Según los métodos estándar, las sondas de oligonucleótidos marcadas con 32P ATP deben alcanzar una actividad específica de aproximadamente 107 cpm/pmol. La solución de hibridación debe contener 2×106-5×106cpm sonda/ml. Hibride durante 2-3 horas a 55 °C con agitación lenta, luego enjuague rápidamente la membrana de hibridación con solución de lavado (2×SSC, 0,1 % SDS) a 30-55 °C para eliminar el exceso de sonda. Luego se lava la membrana y las condiciones varían según la sonda utilizada: sonda mixta común, lavar la membrana a 55°C por 10 minutos, sondas MY12, MY13 y MY16, 56-57°C por 10 minutos y cambiar la membrana; líquido y lavar nuevamente; sonda MY14 y WD74, 10 minutos a 58-59°C, cambiar también el líquido y lavar nuevamente.

El método PCR es superior al método de hibridación de ácidos nucleicos para detectar el VPH. Tiene alta sensibilidad El método GP-PCR utiliza electroforesis en gel para analizar directamente los resultados y puede detectar 200 copias de ADN del VPH en la muestra. Si se utiliza la hibridación de ácidos nucleicos para detectar el producto de PCR, la sensibilidad mejora y 10 copias de. Se puede detectar el ADN del VPH.

En vista de la alta sensibilidad de la tecnología PCR, utilizar células exfoliadas del tracto reproductivo como material de prueba es suficiente para cumplir con los requisitos de la prueba, evitando las complicadas operaciones de biopsia y trituración de tejido. En circunstancias normales, el producto de amplificación por PCR se somete a electroforesis en gel y se puede observar el ADN resultante para realizar un diagnóstico directo. Por tanto, la tecnología PCR para detectar el VPH tiene un ciclo experimental corto, es sencilla y rápida.

Diagnóstico diferencial

1. Carcinoma genital de células escamosas; más común en ancianos o mayores de 40 años. Las lesiones cutáneas se infiltran hacia abajo, se producen úlceras y hay cambios característicos en la histopatología.

2. Condiloma plano: múltiples pápulas húmedas fusionadas en lesiones cutáneas escamosas, más comunes alrededor del ano, se pueden encontrar Treponema pallidum en las lesiones cutáneas y la prueba del suero de sífilis es positiva.

3. Papulosis perlada del pene: pápulas de color piel o rosa claro del tamaño de cabezas de alfiler y granos de mijo dispuestas a lo largo del surco coronal. La histopatología no mostró células huecas.

4. Pseudocondiloma: el daño son pápulas de color rojo claro de tamaño miliar o cambios vellosos limitados a los labios menores. La superficie de las lesiones cutáneas es lisa, la prueba del blanco de ácido acético es negativa y no hay células huecas con importancia diagnóstica en patología.

5. La papulosis bowenoide es una pequeña pápula pigmentada o de color marrón rojizo, y la histopatología muestra células escamosas atípicas e imágenes de tejido similares al carcinoma in situ.

Prevención

Controlar las ETS es la mejor manera de prevenir la AC. Se ha descubierto que los pacientes y sus parejas sexuales deben recibir tratamiento; se debe llevar a cabo educación sanitaria y control de la conducta sexual; los condones del pene pueden prevenir la infección por VPH y actualmente no existe una vacuna eficaz.