Papel sintético para virus

Según información pública, la mayor parte del equipo de investigación de este estudio está formado por científicos de la Universidad de Berna en Suiza, así como de muchas universidades científicas e instituciones sanitarias relacionadas en Alemania y Rusia. El equipo de investigación cree que el uso de la secuencia conocida del genoma viral para construir rápidamente el nuevo coronavirus mediante genética inversa puede reemplazar el suministro de cepas de virus infecciosos a los departamentos y laboratorios de atención médica y, a través de la variación genética y la caracterización funcional de genes individuales, proporcionar tiempo para una rápida respuesta a la aparición de enfermedades infecciosas.

Como se afirma en el artículo, la genética inversa se considera una herramienta importante para cambiar la comprensión humana de la patogénesis viral y el desarrollo de vacunas. Los genomas de virus de ARN grandes, como los genomas de los coronavirus, son difíciles de replicar y manipular en huéspedes de E. coli debido a sus genomas grandes e inestables, por lo que requieren una plataforma de genética inversa rápida y poderosa. Esta vez, un equipo de investigación suizo informa sobre una plataforma de genómica sintética basada en levaduras. Esta plataforma se utiliza para la reconstrucción genética de virus de ARN como coronavirus, flavivirus y paramixovirus. El equipo de investigación verificó primero la precisión de la plataforma en otros virus de ARN (como el virus de la hepatitis de ratón MHV) y probó la capacidad de replicación genética de 59 cepas de virus de la hepatitis de ratón que contienen proteína verde fluorescente (MHVGFP). Los resultados indican que el YAC del genoma de MHV se ensambló correctamente en las réplicas experimentales. Esto muestra que la eficacia del ensamblaje de virus en levaduras es muy alta.

Utilizando esta plataforma, los investigadores modificaron y resucitaron el nuevo coronavirus una semana después de recibir los fragmentos de ADN sintético. Los investigadores crearon una versión sintética del genoma del nuevo coronavirus a partir de células de levadura mucho más rápido que con otros métodos. El genoma del nuevo coronavirus está compuesto de ARN, pero el protocolo desarrollado por un equipo de investigación de la Universidad de Berna en Suiza utiliza 12 segmentos superpuestos del genoma del nuevo coronavirus para convertirlo en ADN. El equipo insertó los fragmentos de ADN en células de Saccharomyces cerevisiae, que los unieron en un genoma viral completo. Luego, el equipo volvió a convertir el genoma sintético en ARN e insertó la cadena en células humanas para crear un virus vivo.

En este estudio, el equipo de investigación suizo demostró todas las capacidades de una plataforma genómica sintética basada en levadura que puede reconstruir los genes de coronavirus, flavivirus, paramixovirus y otros virus de ARN. Los fragmentos subgenómicos virales se generan a partir de ADN viral, muestras clínicas o ADN sintético y luego se replican mediante recombinación asociada a transformación (TAR) para recombinarse una vez en S. cerevisiae para mantener el genoma como un cromosoma artificial de levadura (YAC). La ARN polimerasa T7 se utiliza para generar ARN infeccioso para rescatar virus viables.