¿Qué características tienen en común las amebas y los paramecios?
Los protozoos son el grupo de animales más primitivo. Entre varios protozoos, los más familiares para los estudiantes de secundaria son Paramecium y Amoeba. Este artículo describe los métodos de recolección y cría de estos dos animales.
1. Paramecium (Paramecium)
El paramecio es un ciliado entre los protozoos y es un protozoo de gran tamaño. Está ampliamente distribuido en la naturaleza, es fácil de recolectar y cultivar y es un buen material para observar y estudiar protozoos. Hay muchos tipos de Paramecium, entre los cuales Paramecium caudalis es el más grande y común.
1. Adquisición
Los paramecios suelen vivir en acequias, estanques y campos de arroz con bajos caudales de agua, y en su mayoría se reúnen cerca de la superficie del agua con rica materia orgánica y suficiente luz. Cuando la temperatura del agua es de 14 ~ 22 ℃, estos hábitos de Paramecium son una base importante para determinar el lugar y el método de recolección.
(1) Recoger paramecio en acequias y estanques. Las zanjas y los estanques son los principales hábitats del paramecio. En la estación cálida, cuando vaya a acequias o estanques con agua no contaminada, elija un lugar con muchas ramas y hojas muertas y utilice una jarra para recoger el agua del estanque a lo largo de la superficie del agua. El agua de esta piscina suele contener muchos paramecios. Para estar más seguro, puedes escoger algunas botellas más de diferentes lugares. Después de recolectar, coloque algunas plantas acuáticas en el frasco y deje la botella abierta para evitar que el paramecio se asfixie por falta de oxígeno.
Después de regresar al laboratorio, el frasco que contiene el agua de la piscina debe colocarse en un lugar cálido y luminoso, lejos de la luz solar directa, para permitir que el Geppetto del frasco se multiplique rápidamente. Después de tres a cinco días, mire la luz a simple vista. Si ve muchos pequeños puntos blancos nadando en el agua, probablemente sea Paramecium. En este momento, use una pipeta para aspirar una gota de agua con pequeños puntos blancos, colóquela en un portaobjetos de vidrio y observe con un microscopio. Se pueden ver varios organismos diminutos en el campo de visión. Si encuentras un animal pequeño que parece una sandalia de paja al revés y se queda en forma de espiral, es un paramecio y la colección fue un éxito.
(2) Recoger paramecio en campos de arroz. Al regar los campos de arroz, busque rastrojos de arroz viejos en el campo, use una jarra para recolectar agua cerca del rastrojo de arroz y luego coloque un poco de paja de arroz vieja en él. A menudo hay muchos paramecios en esa agua. Después de regresar al laboratorio, colóquelo en un lugar cálido y luminoso, y después de tres a cinco días, use un microscopio para verificar la presencia de paramecio.
(3) Recoger el paramecio de la paja fresca. Cuando el ambiente se vuelve seco o frío, Paramecium puede secretar una película de proteína a la superficie del cuerpo. El insecto no puede comer ni moverse y entra en un estado latente. Esta condición se llama quiste. Cuando se drena el agua de los arrozales, el paramecio forma muchos quistes que se adhieren a varios tallos cerca de las raíces de la paja del arroz. Por tanto, podemos seleccionar varios trozos de paja fresca cerca de las raíces, cortarlos en trozos de 3 a 4 cm de largo, ponerlos en un frasco, llenarlos con agua y ponerlos en un lugar luminoso y cálido. Después de una semana, podemos usar un microscopio para comprobar si hay paramecio.
2. Preparar la solución de cultivo
El alimento de Paramecium son principalmente bacterias. Para cultivar y propagar Paramecium, es necesario preparar una solución de cultivo que contenga una gran cantidad de bacterias. Generalmente existen dos métodos para preparar el líquido de cultivo.
(1) Medio de cultivo paja. Tome pajita fresca y limpia, retire algunos nudos en el extremo superior y en la base, corte el tallo de arroz del medio en trozos de 3 a 4 cm de largo, ponga la pajita y el agua en un vaso grande en una proporción de 1 gramo de pajita por 100 ml. de agua a fuego medio, calentar y hervir durante 10-15 minutos, dejar de calentar cuando el líquido se torne marrón. Dicho líquido se calienta y se hierve, dejando solo esporas bacterianas y todos los demás organismos mueren, lo que crea buenas condiciones para el cultivo de Paramecium. Para evitar que otros quistes de protozoos caigan al aire y evitar que los mosquitos pongan huevos, la boca del vaso debe envolverse herméticamente con una doble capa de gasa. Luego colóquelo en un lugar cálido y luminoso para la reproducción bacteriana.
Después de 3 a 4 días, las esporas de Bacillus subtilis en la paja de arroz comienzan a germinar y multiplicarse rápidamente dependiendo de los ricos nutrientes en el líquido de la paja de arroz, y el líquido gradualmente se vuelve turbio. El cultivo en paja se realiza cuando una gran cantidad de bacterias forman una película de color blanco grisáceo en la superficie del líquido. Debido a que a Paramecia le gusta un ambiente ligeramente alcalino, si el medio de cultivo es ácido, puedes usar 1 bicarbonato de sodio para hacerlo ligeramente alcalino, pero el valor del pH no puede ser superior a 7,5.
(2) Solución de cultivo de grano de trigo. Poner 5 g de granos de trigo (cebada y trigo) en 1000 ml de agua, calentar y hervir hasta que los granos se hinchen y se agrieten.
Luego colóquelo en un lugar cálido y luminoso durante 3 a 4 días y se preparará el líquido de cultivo del grano de trigo. En este momento, una gran cantidad de bacterias se han multiplicado en la solución de cultivo.
Vacunación
La vacunación es el proceso de transferir el Paramecium recolectado al medio de cultivo. El paramecio debe purificarse al inocularse, de lo contrario se mezclará con otros animales pequeños. Esto no sólo afectará la pureza del paramecio, sino que también provocará una fuerte disminución en la cantidad de paramecio una vez mezclado con el enemigo natural del paramecio, Paramecium trichophyton.
Al inocular, primero inhale el agua que contiene Paramecium en el espejo de la superficie y luego revise el espejo de la superficie con un microscopio de baja potencia o un microscopio de disección. Después de descubrir el paramecio, utilice una micropipeta con un diámetro no superior a 0,2 mm para aspirar el paramecio del cristal de reloj uno por uno e inocularlo en un frasco de medio de cultivo para su reproducción.
Si desea cultivar Paramecium puro, puede succionar un Paramecium del espejo de superficie bajo un microscopio o espejo de disección según el método anterior, colóquelo en una lente cóncava llena con una pequeña cantidad de cultivo. medio y luego cubra la lente cóncava Evite que el medio de cultivo se seque. Cuando el paramecio se divide lateralmente y alcanza de 20 a 30 individuos, se traslada a un tanque de cultivo para su reproducción.
Cultivo
(1) Coloque el frasco inoculado con medio de cultivo de Paramecia en un lugar cálido y luminoso para el cultivo, y la boca del recipiente del medio de cultivo debe envolverse herméticamente con una gasa. Después de aproximadamente 1 semana, aparecerá una gran cantidad de paramecio.
(2) Si se trata de un cultivo a largo plazo, el medio de cultivo debe actualizarse periódicamente. Esto se debe a que a medida que los gusanos se reproducen en grandes cantidades, los nutrientes en el medio de cultivo disminuyen gradualmente y los metabolitos secretados por los gusanos continúan aumentando, lo que conducirá a una reducción en la cantidad de paramecio o incluso a la muerte de todos ellos. Por lo tanto, durante el proceso de cultivo, el medio de cultivo debe actualizarse aproximadamente cada 3 días. Al actualizar, use una pipeta para aspirar el medio de cultivo y el sedimento en el fondo del frasco, succione la mitad del medio de cultivo a la vez y agregue una cantidad igual de medio de cultivo fresco. Esto le permite conservar el paramecio durante mucho tiempo.
Observación
Bajo el microscopio, Paramecium nada rápidamente y es difícil de observar. Se pueden utilizar los siguientes métodos para limitar y ralentizar su movimiento: coloque una pequeña cantidad de fibra de algodón en el portaobjetos, deje caer el líquido de cultivo de Paramecium, cúbralo con un cubreobjetos y obsérvelo primero con un microscopio de baja potencia. Si el paramecio todavía nada, use un trozo de papel absorbente para absorber un poco de agua en un lado del cubreobjetos hasta que sea fácil de observar. También puede aplicar una pequeña cantidad de fijador de clara de huevo en el portaobjetos, luego dejar caer una gota de líquido de cultivo de Paramecium y observar después de que el agua se seque ligeramente. El método de preparación del fijador de clara de huevo es revolver las claras de manera uniforme, agregar una cantidad igual de glicerina y mezclar.
(1) Observar la estructura morfológica de Paramecium. Al microscopio se observaron las siguientes estructuras morfológicas de Paramecium:
① Distinguir el extremo anterior y el extremo posterior del gusano. La parte delantera es redonda y la trasera puntiaguda. La longitud del cuerpo es de aproximadamente 0,15 ~ 0,30 mm.
②Membrana superficial. Es la membrana elástica más externa del cuerpo del insecto, con densos cilios en la membrana superficial.
③Citoplasma. Dividido en dos partes: ectoplasma y endoplasma. El ectoplasma es delgado y transparente debajo de la membrana superficial, y el endoplasma está dentro del ectoplasma, que es multiparticulado y fluido.
④ Surco bucal, boca y faringe. El surco estomático es un surco longitudinal que corre oblicuo hacia la parte frontal del gusano. La abertura de la celda es el pequeño orificio en la parte inferior del surco estomático, y la faringe es el codo en forma de embudo debajo de la abertura de la celda. En la cavidad faríngea existen cilios vibrantes, que tienen la función de transportar los alimentos.
⑤Vacuolas alimentarias. Una vez que los alimentos ingresan a la cavidad faríngea, están rodeados de protoplasma para formar vacuolas alimentarias y luego ingresan a la circulación en el citoplasma. Puede colocar una gota de tinta a lo largo del costado de un cubreobjetos y observar cómo las partículas de tinta ingresan al cuerpo del gusano, forman vacuolas alimenticias y circulan por todo el cuerpo.
⑥Reduce la burbuja. Hay uno en la parte delantera y trasera del cuerpo, y hay de 6 a 7 tubos colectores alrededor de cada burbuja de contracción. Se debe observar cuidadosamente el patrón de contracción de la burbuja de contracción y del tubo colector.
⑦ Burbujas de seda espinosas. Las vesículas del huso son vesículas pequeñas de forma ovalada ubicadas en el ectoplasma debajo de la membrana superficial y dispuestas de manera ordenada. Si pones una gota de 1 solución de yodo en un lado del cubreobjetos, podrás ver que sale un alambre delgado.
8 núcleos. El paramecio tiene dos núcleos, uno grande y otro pequeño, que son difíciles de ver en los organismos vivos. Coloque una gota de ácido acético glacial al 5% en un lado del cubreobjetos. Después de 2 a 3 minutos, se pueden ver claramente el núcleo en forma de riñón y el núcleo en forma de anillo en el medio.
(2) Observar el movimiento del gusano.
Al atenuar la luz del microscopio, podemos ver que el cuerpo del insecto está cubierto de cilios, que se balancean constantemente, especialmente en el surco bucal, haciendo que el cuerpo del insecto gire hacia adelante o hacia atrás.
(3) Observar la reproducción de Paramecium, incluyendo la reproducción asexual y la reproducción sexual.
①Reproducción asexual. Utilice una pipeta común para absorber el líquido de cultivo de paramecio y colóquelo en un portaobjetos de vidrio. Cuando se observe Paramecium, utilice otra micropipeta para aspirar de 1 a 2 Paramecium hinchados, transfiéralo a otro portaobjetos y agregue unas gotas de medio de cultivo sin paramecio. Para evitar que las gotas onduladas se evaporen, puede colocar el portaobjetos en una placa de Petri, colocar previamente un algodón absorbente húmedo en el fondo de la placa de Petri, colocar dos varillas de vidrio cortas horizontalmente sobre el algodón, colocar el portaobjetos sobre el vidrio. varilla, y finalmente Cubrir la placa de Petri. Esto crea un ambiente completamente húmedo que mantiene secas las gotas del portaobjetos durante varios días.
Coloca el dispositivo en un lugar cálido y obsérvalo con un microscopio cada 1 o 2 horas. Podrás observar la reproducción asexual del cuerpo del gusano dividiéndose lateralmente. Durante la reproducción asexual de Paramecium, las células se alargan, la parte media se hunde hacia adentro, los núcleos grande y pequeño se dividen en dos y finalmente se forman dos Paramecium lateralmente.
②Reproducción sexual. La reproducción sexual en Paramecium es reproducción cigótica. Para ver la reproducción del cigoto, podemos usar una centrífuga para concentrar la solución de cultivo de Paramecium, succionar el Paramecium, ponerlo en una placa de Petri, agregar de 10 a 15 veces de agua limpia y evitar la luz durante 12 horas, como puede ver. 10 a 30 Paramecium, para luego proceder a la reproducción cigótica. Durante el apareamiento y la reproducción, los surcos bucales de los dos insectos están muy juntos. En este momento, los núcleos grandes del otro suelen desaparecer.
2. Ameba (Amoeba)
La ameba pertenece a la clase carniana de protozoos, y existen muchos tipos. Amoeba metamorphosus es una especie común que se encuentra en agua dulce. Las amebas viven principalmente en estanques poco profundos, zanjas, arrozales y otros entornos donde la calidad del agua es relativamente clara y hay muchas algas y bacterias.
1. Adquisición
(1) Recoger plantas podridas del agua. En verano y otoño suele haber muchas plantas podridas en estanques y zanjas poco profundas. O flotan en el agua o se hunden en el agua. La superficie de estas plantas en descomposición es un buen lugar para que las amebas vivan y se reproduzcan, y a menudo hay muchas amebas grandes. Recoja las plantas podridas, póngalas en un frasco, vierta agua de piscina adecuada, llévelas al laboratorio, raspe el material pegajoso de la superficie de las plantas podridas, haga una pieza temporal y compruébela con un microscopio. Si ve algunas cosas granulares translúcidas, semilíquidas y bien definidas, como gotas de aceite, en su campo de visión, se trata de una ameba.
(2) Recoger agua de estanque que contenga diatomeas. A las amebas les gusta comer diatomeas. El agua de los estanques que contienen diatomeas suele ser de color marrón amarillento y, a menudo, hay muchas espumas de color marrón amarillento en el agua cerca de la orilla. Además de las diatomeas, a menudo hay muchas diatomeas que se alimentan de amebas. Puede poner el agua espumosa de la piscina en un frasco y llevarla al interior para examinarla microscópicamente.
(3) Recoger de paja fresca o maleza. La ameba puede formar quistes inactivos en ambientes hostiles. Por lo tanto, los quistes de amebas suelen estar adheridos a las partes inferiores de la paja fresca y a algunas malas hierbas ribereñas. Remoje esta paja o hierba en un tanque de cultivo lleno de agua de estanque y colóquelo en un lugar cálido y luminoso. Después de 1 a 2 semanas, se forma una película amarilla quemada en la superficie del agua y, a menudo, hay una gran cantidad de amebas germinadas a partir de los quistes en la película.
Separadas
Las amebas tienen la costumbre de aferrarse a los objetos cuando cambia el entorno. Siguiendo este hábito, después de descubrir una ameba bajo el microscopio, haga vibrar suavemente el portaobjetos que contiene la ameba. Luego incline el portaobjetos, enjuáguelo lentamente con agua durante unos minutos y vuelva a colocarlo bajo el microscopio para su observación. Se puede ver que otros animales acuáticos han sido arrastrados, y solo la ameba está inmóvil y aferrada al portaobjetos de vidrio, logrando así el propósito de aislar a la ameba.
3. Preparación del medio de cultivo
El medio de cultivo de ameba incluye medio de cultivo de paja de arroz, medio de cultivo de grano de trigo y medio de cultivo de arroz. Los principios y métodos de preparación de las dos primeras soluciones de cultivo son los mismos que los de Paramecium. Agregue de 3 a 4 granos de arroz a 100 ml de agua para preparar el medio de cultivo de arroz. Esta solución de cultivo a menudo produce una gran cantidad de flagelados incoloros para que los coma la ameba.
Cultivo
Coloque el portaobjetos aislado con solo ameba en el medio de cultivo, envuelva bien la boca del recipiente que contiene el medio de cultivo con una gasa y colóquelo en un lugar cálido y luminoso. . lugar. Después de aproximadamente medio mes de cultivo, se producirá una gran cantidad de amebas.
Observación
Utilice unas pinzas para sacar una sección de paja de arroz de la solución de cultivo de paja de arroz, o saque un grano de trigo o un grano de arroz de la solución de cultivo de grano de trigo o arroz. solución de cultivo en paja y colóquela en el frotis varias veces en el portaobjetos, luego deje caer una pequeña cantidad de solución de cultivo, colóquela bajo el microscopio, atenúe la luz en el campo de visión y encontrará la ameba.
Después de encontrar la ameba, obsérvela con un objetivo de alta potencia, observe cuidadosamente el movimiento y los métodos de alimentación de la ameba, e identifique el ectoplasma y el endoplasma en su cuerpo, así como la vacuola alimentaria y la vacuola de contracción. en el endoplasma. Si tiñes con verde de metilo, podrás ver que los núcleos celulares están teñidos de verde.