Método Kjeldahl

1. Digestión: Pesar con precisión aproximadamente 1,0 g de muestra de soja, colocarlo en un tubo de digestión seco de 250 ml, añadir 0,4 g de CuSO4, 7 g de K2SO4, 10 ml de H2SO4 y carbonizar primero a 200 °C, luego aumentar la temperatura. después de que cese la formación de espuma, caliente a 450 °C hasta que el líquido hierva. Después de que el líquido de la botella se vuelva azul verdoso y transparente, continúe calentando durante 0,5 horas.

Después de enfriar, añadir 20ml de agua, transferirlo a un matraz aforado de 100ml, lavar el tubo digestivo 2 a 3 veces con una pequeña cantidad de agua y combinar los lavados en el matraz aforado para ajustar al volumen. .

2. Destilación: Conectar el dispositivo de determinación de nitrógeno Kjeldahl, llenar la botella generadora de vapor de agua hasta 2/3, añadir unas gotas de indicador rojo de metilo y unos ml de ácido sulfúrico para mantener el agua ácida. Agregue algunas cuentas de vidrio para evitar golpes, ajuste el fuego para calentar el agua en la botella generadora de vapor de agua hirviendo.

3. Agregue 20 ml de solución de ácido bórico de 20 g/l y 2 gotas de indicador mixto en la botella de absorción, inserte el extremo inferior del tubo del condensador por debajo del nivel del líquido y extraiga 10 ml de diluyente de digestión de muestra. el puerto de inyección en la cámara de reacción, y lave el puerto de inyección con 10 ml de agua para que fluya hacia la cámara de reacción, vierta 10 ml de solución de NaOH de 400 g/l en el puerto de inyección, sujete inmediatamente la abrazadera de tornillo y agregue una pequeña cantidad de destilado. agua y selle el puerto de inyección.

Cuando se introduce el vapor en la cámara de reacción, cronometrarlo con precisión. El amoniaco producido por la reacción ingresa a la botella de absorción a través del tubo del condensador, se destila durante 5 minutos, mueve la botella de absorción de modo que el extremo inferior. del tubo del condensador sale de la superficie del líquido, se destila nuevamente durante 1 minuto y luego enjuaga el exterior del extremo inferior del tubo del condensador con una pequeña cantidad de agua y retira la botella de absorción.

Deje de calentar, permita que el líquido de la cámara de reacción entre en el separador de vapor-agua, abra la abrazadera en espiral de la entrada y libere el líquido en el separador de vapor-agua. Luego agregue agua destilada a la cámara de reacción, apriete la abrazadera de tornillo, caliente nuevamente hasta que se libere vapor de agua, deje de calentar y permita que el agua de la cámara de reacción ingrese al separador de agua y vapor para lavarla.

4. Titulación: Titular la solución de absorción con solución estándar de ácido sulfúrico de 0,025 mol/L hasta que se vuelva gris.

5. Cálculo: El consumo de líquido es el volumen de solución estándar de ácido sulfúrico, ml; m es la masa de la muestra, g.

Notas

(1) La muestra debe ser uniforme. Las muestras sólidas se deben moler y mezclar previamente, y las muestras líquidas se deben agitar o agitar uniformemente.

(2) Cuando se coloque la muestra en la botella de nitrógeno, no se pegue al cuello. Si la muestra está contaminada, se puede lavar con una pequeña cantidad de agua para evitar una digestión incompleta de la muestra y resultados bajos.

(3) Si no es fácil formar una solución transparente durante la digestión, puede enfriar la botella de nitrógeno y agregar lentamente 2-3 ml de peróxido de hidrógeno (H2O2) al 30% para promover la oxidación.

(4) No utilizar fuego fuerte durante todo el proceso de digestión. Mantener un hervor suave y concentrar el fuego en el fondo del matraz Kjeldahl para evitar que la proteína adherida a la pared pierda nitrógeno en ausencia de ácido sulfúrico.

(5) Si falta ácido sulfúrico, demasiado sulfato de potasio provocará la pérdida de amoníaco, que formará hidrogenosulfato de potasio sin interactuar con el amoníaco. Por lo tanto, cuando se consume demasiado ácido sulfúrico o el contenido de grasa en la muestra es demasiado alto, se debe aumentar la cantidad de ácido sulfúrico.

(6) La función de agregar sulfato de potasio es aumentar el punto de ebullición de la solución, el sulfato de cobre es un catalizador y el sulfato de cobre se usa como indicador de la reacción alcalina durante la destilación.

(7) El indicador mixto aparece verde en solución alcalina, gris en solución neutra y rojo en solución ácida. Si no se dispone de verde de bromocresol, se puede utilizar sola una solución de etanol rojo de metilo al 0,1%.

(8) Si el amoníaco se ha destilado por completo, puedes utilizar un papel de prueba de pH para comprobar si el destilado es alcalino.

Información ampliada:

Principio del método de determinación de nitrógeno Kjeldahl

El método de determinación de nitrógeno Kjeldahl calienta primero materia orgánica que contiene nitrógeno y ácido sulfúrico concentrado. procesos complejos como descomposición, carbonización y reacciones redox, y finalmente el nitrógeno orgánico se convierte en sulfato de nitrógeno y amonio inorgánico. Este proceso se llama digestión de la materia orgánica.

Para acelerar y descomponer completamente la materia orgánica y acortar el tiempo de digestión, generalmente se agregan durante la digestión reactivos como sulfato de potasio, sulfato de cobre, óxido de mercurio y peróxido de hidrógeno. La adición de sulfato de potasio puede aumentar la ebullición. Punto del jugo digestivo y Para acelerar la descomposición de la materia orgánica, además del sulfato de potasio, también se pueden agregar sales como el sulfato de sodio y el cloruro de potasio para aumentar el punto de ebullición, pero el efecto no es tan bueno como el sulfato de potasio.

El sulfato de cobre actúa como catalizador.

Hay muchos tipos de catalizadores disponibles en el método de determinación de nitrógeno de Kjeldahl, además del sulfato de cobre, también hay óxido de mercurio, mercurio, selenio en polvo, molibdato de sodio, etc. Sin embargo, considerando varios factores como el efecto, el precio y la contaminación ambiental, El catalizador más utilizado es el sulfato de cobre.

Referencia: Enciclopedia Baidu-Método Kjeldahl