Principios básicos del diagnóstico molecular

Las principales tecnologías para el diagnóstico molecular incluyen la hibridación molecular de ácidos nucleicos, la reacción en cadena de la polimerasa y la tecnología de biochips.

1. La tecnología de hibridación molecular de ácidos nucleicos tiene una determinada secuencia complementaria y un proceso en el que una sola hebra de nucleótidos se asocia en un heterodúplex en fase líquida o sólida según el principio de apareamiento de bases complementarias, que es llamada hibridación molecular de ácidos nucleicos. Las dos partes de la hibridación son la secuencia de ácido nucleico que se va a probar y la secuencia de la sonda. Esta tecnología se puede utilizar para la detección cualitativa o cuantitativa de secuencias específicas de ADN o ARN.

2. Principio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR): La PCR es una reacción enzimática entre el ADN molde, los cebadores y cuatro trifosfatos de desoxirribosa ribósido (dNTP) bajo la acción de la reacción de polimerización de la ADN polimerasa para amplificar el ADN objetivo deseado. Incluye tres pasos básicos: calentar y desnaturalizar la plantilla de ADN bicatenario en ADN monocatenario (desnaturalización); emparejamiento complementario de cebadores con ADN monocatenario a bajas temperaturas (recocido y TapDNA polimerasa que cataliza la extensión del cebador a lo largo del ADN molde); a una temperatura adecuada.

3. La tecnología Biochip es una tecnología de análisis y detección de ácidos nucleicos desarrollada en los últimos años que combina la biología molecular y la tecnología microelectrónica. La tecnología de biochip original se utilizaba principalmente para la determinación de la secuencia de ADN, la identificación del perfil de expresión genética y la detección y análisis de mutantes genéticos, por lo que también se denomina tecnología de chip de ADN o chip genético. Dado que esta tecnología ahora se ha expandido a campos distintos del ácido nucleico, como la respuesta inmune y la unión de receptores, y han aparecido chips de proteínas, chips inmunes, chips de células, chips de tejidos, etc., el nombre de tecnología de biochips está más en línea con la tendencia de desarrollo. .