¿Qué es la derivatización? ¿Clasificación de experimentos de derivatización?
La tecnología de derivatización consiste en convertir cuantitativamente un compuesto objetivo que es difícil de analizar y detectar en una muestra en otro compuesto que es fácil de analizar y detectar mediante reacciones químicas. El compuesto objetivo puede ser un análisis cualitativo y (o) cuantitativo. Esta tecnología se utiliza ampliamente en el análisis cromatográfico. Dependiendo de si la reacción de derivatización ocurre antes o después de la separación cromatográfica, la derivatización se puede dividir en derivatización previa a la columna y derivatización posterior a la columna.
1. El propósito de la derivatización previa a la columna
La derivatización previa a la columna es hacer reaccionar químicamente la muestra con ciertos reactivos químicos antes de la separación cromatográfica y preparar el compuesto objetivo en la muestra en A continuación se separan los derivados apropiados y se detectan mediante cromatografía.
①Convertir algunos compuestos que no son aptos para el análisis mediante una determinada técnica cromatográfica en derivados que puedan analizarse mediante esa técnica cromatográfica. Por ejemplo, algunos compuestos con altos puntos de ebullición, no vaporización o inestabilidad térmica no pueden analizarse mediante cromatografía de gases. Se convierten en derivados vaporizables o térmicamente estables mediante derivatización y luego se analizan mediante cromatografía de gases.
② Mejorar la sensibilidad de detección (reducir el límite de detección). Por ejemplo, el detector UV de cromatografía líquida es muy sensible, pero muchos compuestos no tienen absorción de UV o tienen una absorción de UV muy débil. dado a través de la reacción de derivatización La unión de un grupo con fuerte absorción de rayos UV mejora la sensibilidad de detección de estos compuestos. Otro ejemplo es que el detector de captura de electrones (ECD) de la cromatografía de gases tiene una alta sensibilidad a los compuestos que contienen halógenos. Algunos compuestos se pueden conectar a grupos halógenos mediante reacciones de derivatización para mejorar la sensibilidad de detección de estos compuestos.
③Cambia el rendimiento cromatográfico del compuesto y mejora la separación. Por ejemplo, algunos isómeros son difíciles de separar por cromatografía. Mediante la reacción de derivatización, las propiedades cromatográficas de los derivados generados por los dos isómeros son muy diferentes y están separadas. Para algunos pares de sustancias que son difíciles de separar, también se pueden usar ciertos reactivos de derivatización para permitir que solo uno de ellos experimente una reacción de derivatización y se convierta en un derivado, y los dos se pueden separar.
④ El uso de reacciones de derivatización puede ayudar a identificar la estructura de los compuestos. Esto es más obvio cuando se utilizan cromatografía y espectrometría de masas, cromatografía y espectroscopia infrarroja y cromatografía y espectroscopia de RMN para determinar la estructura de los compuestos.
El propósito de la derivatización precolumna en diferentes modos de cromatografía tiene diferente énfasis. En la cromatografía de gases, la derivatización precolumna es principalmente mejorar la volatilidad del compuesto objetivo, mientras que en la cromatografía líquida y la cromatografía en capa fina; , La derivatización previa a la columna es El objetivo principal de la optimización es mejorar las capacidades de detección. Por lo tanto, los métodos de derivatización previos a la columna y todos los reactivos de derivatización de diferentes modos son ligeramente diferentes. 2. Condiciones para la derivatización previa a la columna
La reacción de derivatización utilizada en la derivatización previa a la columna en cromatografía debe cumplir las siguientes condiciones:
① La reacción se puede llevar a cabo de forma rápida y cuantitativa. La repetibilidad es buena, las condiciones de reacción no son duras y la operación es sencilla.
② La reacción es altamente selectiva y lo mejor es reaccionar sólo con el compuesto objetivo, es decir, la reacción debe ser específica.
③ Solo hay un producto de reacción de derivatización, y los subproductos de la reacción y el exceso de reactivos de derivatización no deben interferir con la separación y detección del compuesto objetivo.
④ Los reactivos de derivatización deben ser convenientes y fáciles de obtener y tener buena versatilidad.
En resumen, la derivatización previa a la columna puede ampliar el alcance de aplicación del análisis cromatográfico y hacer que los resultados del análisis cromatográfico sean más satisfactorios. Por lo tanto, la derivatización previa a la columna es un método importante para el procesamiento de muestras cromatográficas. En la reacción de derivatización, no es necesario que todos los reactivos de derivatización reaccionen. Por lo general, la cantidad de reactivos de derivatización que agregamos es excesiva, a veces incluso en grandes cantidades, y muy pocos realmente participan en la reacción, siempre que los productos de derivatización sean tan largos. al no coincidir la hora punta con otras puntas,