¿Por qué se debe filtrar y desgasificar la fase móvil de HPLC antes de su uso?

La fase móvil utilizada en la cromatografía líquida de alta resolución debe desgasificarse previamente; de ​​lo contrario, las burbujas se escaparán fácilmente del sistema y afectarán el funcionamiento de la bomba. Las burbujas también pueden afectar la eficiencia de separación de la columna cromatográfica, la sensibilidad del detector, la estabilidad de la línea base e incluso hacer que sea imposible de detectar.

El ruido aumenta, la línea base es inestable y salta repentinamente. Además, el oxígeno disuelto en la fase móvil puede reaccionar con la muestra, la fase móvil e incluso con fases estacionarias como las alquilaminas. Los gases disueltos también pueden provocar cambios en el pH del disolvente, provocando errores en la separación o en los resultados del análisis.

Los métodos de desgasificación comunes incluyen calentamiento y ebullición, aspiración, ondas ultrasónicas, soplado de helio, etc.

La cromatografía líquida de alta resolución es una rama importante de la cromatografía. El sistema de perfusión de alta presión utiliza líquido como fase móvil y bombea disolventes individuales de diferentes polaridades o disolventes mixtos y tampones de diferentes proporciones a la columna cromatográfica de fase estacionaria. Una vez separados los componentes de la columna, un detector los detecta. Se realizó el análisis de muestras.

Datos ampliados:

La cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) puede agregar capacidades analíticas adicionales para identificar y cuantificar con precisión compuestos traza en matrices de muestras complejas, como células y lisados ​​de tejido. , sangre, plasma, orina y fluidos orales.

Tanto la fase móvil como la fase estacionaria son líquidas. La fase móvil es incompatible con la fase estacionaria (polaridad diferente para evitar la pérdida de solución estacionaria) y la interfaz es clara. Cuando la muestra ingresa a la columna, los solutos se dividen entre las dos fases. Después de alcanzar el equilibrio, siga la fórmula de cálculo de HPLC.

En la fórmula, cs es la concentración de soluto en la fase estacionaria, cm es la concentración de soluto en la fase móvil, vs es el volumen de la fase estacionaria y vm es el volumen de la fase móvil. fase. Llpc es similar a gpc, es decir, el orden de separación depende del valor de retención del componente con un valor K más alto, pero también existen diferencias. En gpc, el caudal tiene un pequeño impacto en K, mientras que el caudal de llpc tiene un gran impacto en K.

Enciclopedia Baidu: cromatografía líquida de alto rendimiento