¿Qué es la PCR de desajuste? ¿Cuál es el principio fundamental del uso de PCR de desajuste para aumentar la afinidad de los anticuerpos?

Enumere los resúmenes de dos artículos relacionados, principalmente para examinar bibliotecas de anticuerpos similares a la dirección de selección aleatoria de mutaciones en la teoría de la evolución (proporcione su dirección de correo electrónico si necesita el texto original):

Propósito: Aprobado El método de mutación mejora la afinidad del anticuerpo monocatenario anti-TNFα pscTNF. Método: Utilizando el plásmido pscTNF como plantilla, se utilizó PCR de desajuste para construir una biblioteca de anticuerpos mutantes y variantes con mejoras. Las variantes obtenidas se utilizaron luego como plantillas y utilizando tecnología de PCR de extensión alterna se construyó nuevamente la biblioteca de mutaciones y se evaluaron los clones con actividad mejorada mediante ELISA puntual y ELISA de elución con tiocianato. Se seleccionaron variantes con actividad mejorada a partir de la biblioteca de anticuerpos de PCR no coincidentes, y luego se intercambiaron y recombinaron los sitios de mutación de estas siete variantes mediante PCR de extensión alterna, y se obtuvieron clones con afinidad aún mejorada. Conclusión: la aplicación combinada de PCR no coincidente y extensión alterna. La PCR puede mejorar la afinidad de los anticuerpos monocatenarios.

Propósito: utilizar PCR no coincidente y tecnología de mezcla de ADN para preparar anticuerpos monocatenarios contra el cáncer de hígado. Métodos: utilizar PCR no coincidente y tecnología de mezcla aleatoria de ADN para mutar aleatoriamente. las regiones variables de cadena pesada y cadena ligera del anticuerpo monocatenario A4-16 contra el cáncer de hígado, y la construcción de una biblioteca de mutaciones secundarias de anticuerpos fagos anti-cáncer de hígado, a partir de la cual se seleccionaron cepas mutantes de anticuerpos monocatenarios de alta afinidad utilizando tecnología de presentación en fagos. Resultados: La capacidad de la biblioteca de mutaciones secundarias del anticuerpo contra el fago del cáncer de hígado es de 4,5 × 107, después de tres rondas de detección de enriquecimiento e identificación por ELISA, se obtuvieron dos cepas mutantes, M25 y M36, que no solo conservaron la especificidad del original. clon, pero también tenía índices de afinidad relativa que eran 2 veces y 2,4 veces mayores que los del clon original respectivamente. Conclusión: La PCR de coincidencia combinada con la tecnología de mezcla de ADN puede mejorar la afinidad de los anticuerpos monocatenarios.