Recogida y procesamiento de muestras de sangre para pruebas de química clínica.

1. Definición de muestras de sangre para pruebas de química clínica

Las muestras de sangre para pruebas de química clínica se refieren a una determinada cantidad de sangre extraída para completar uno o más elementos de pruebas de química clínica, incluido el anticoagulado. y sangre no anticoagulada. 2. Recolección de muestras de sangre

(1) Lugar de recolección

1. Recolección de sangre venosa: el método de recolección de sangre más utilizado. Las venas más utilizadas son la vena antecubital y la vena dorsal del carpo, y la vena yugular y la vena fontanela anterior a veces se utilizan en niños y recién nacidos.

2. Extracción de sangre arterial: se utiliza principalmente para análisis de gases en sangre. Las arterias más utilizadas son las arterias femoral, braquial, radial y umbilical.

3. Extracción de sangre capilar: adecuada para experimentos o para bebés que solo requieren una pequeña cantidad de sangre. Los sitios más utilizados son los lóbulos de las orejas y las yemas de los dedos y, a veces, el dedo gordo y el talón en los niños. La aguja de extracción de sangre debe penetrar la piel hasta una profundidad de 2 mm (lt; 2,5 mm) y el área de extracción de sangre debe estar libre de inflamación, edema, etc.

(2) Tipos de muestras

Las muestras de sangre para pruebas de química clínica se dividen en tres tipos: suero, plasma y sangre total. El suero y el plasma se utilizan comúnmente en la práctica clínica, excepto que el primero no contiene fibrinógeno, la mayoría de los demás componentes químicos son los mismos; la sangre completa solo se usa cuando los componentes de los glóbulos rojos son similares a los del plasma; se utiliza para análisis de gases en sangre, electroforesis de hemoglobina, etc., generalmente. La mayoría de los análisis de química clínica no utilizan sangre completa. 3. Procesamiento de sangre total en suero o plasma

Después de recolectar la muestra de sangre, el suero (plasma) debe separarse naturalmente de la sangre total en contacto con las células sanguíneas lo antes posible. Generalmente, el suero o el plasma deben separarse dentro de las 2 horas posteriores a la extracción de sangre. El procesamiento de sangre total en suero o plasma se divide en tres etapas antes de la centrifugación, durante la centrifugación y después de la centrifugación, y existen requisitos específicos para cada etapa diferente.

(1) Etapa de precentrifugación

Es el periodo de tiempo previo a la recogida y centrifugación del libro índice.

1. Suero: Generalmente se debe dejar que la muestra se aglutine por sí sola antes de la centrifugación. No utilizar palos de madera para despegar los coágulos. Normalmente, las muestras de sangre pueden aglutinarse espontánea y completamente cuando se dejan a temperatura ambiente (22~25oC) durante 30~60 minutos; las muestras refrigeradas se aglutinan lentamente cuando se agrega un coagulante (las muestras deben invertirse suavemente y mezclarse de 5 a 10 veces después); recogida para asegurar que el coagulante sea eficaz).

2. Plasma: cuando se requieren muestras de plasma, se debe utilizar un tubo de recolección de muestra de sangre que contenga anticoagulante, y el tubo de recolección de sangre se debe invertir y mezclar suavemente de 5 a 10 veces inmediatamente después de la extracción de sangre (para garantizar que la función anticoagulante), el plasma se puede separar después de 5 a 10 minutos.

3. Muestras refrigeradas: las muestras refrigeradas pueden inhibir el metabolismo celular y estabilizar ciertos componentes que dependen de la temperatura. Sin embargo, las muestras de sangre completa generalmente no se pueden refrigerar durante más de 2 horas. Se requieren muestras refrigeradas para la detección de catecolaminas en sangre, pH/gases en sangre, amoníaco, ácido láctico, piruvato, gastrina, hormona tiroidea, etc.

Cuando las muestras necesitan ser refrigeradas (2~8oC), las muestras deben colocarse en trozos de hielo o en una mezcla de agua helada inmediatamente después de la recolección (no se permiten cubitos de hielo grandes) y el contacto total entre las muestras y se debe asegurar el material refrigerado. Asegúrese de que el objeto refrigerado alcance la altura de la muestra.

4. Inhibidores metabólicos y conservantes: Ciertos aditivos añadidos a las muestras de sangre pueden inhibir el metabolismo celular y prevenir cambios en la concentración del analito durante el almacenamiento de las muestras de sangre. Al medir la glucosa en sangre, si se agrega fluoruro de sodio a la sangre, la glucosa puede permanecer estable durante 24 horas entre 22 y 25 grados Celsius y 48 horas entre 2 y 8 grados Celsius si las células sanguíneas no se separan. y niños, debido a que el volumen de los glóbulos rojos es alto y es difícil controlar la glucólisis de las células con fluoruro de sodio, el conservante anticoagulante de formaldehído y oxalato de potasio no es adecuado para la medición de la glucosa en sangre; no apto para enzimología porque puede inhibir la actividad enzimática.

5. Lugar de recolección de muestras: (1) Las muestras deben enviarse al laboratorio lo antes posible después de la recolección, especialmente cuando la temperatura en el área de recolección excede los 22 °C (2) Los vasos sanguíneos deben taparse después; Para la recolección de muestras de sangre, la boca del tubo debe colocarse hacia arriba y verticalmente para reducir la vibración del contenido del tubo, promover la coagulación completa y evitar la evaporación, la contaminación y las salpicaduras de la muestra (3) Las muestras de sangre recolectadas deben manipularse con cuidado; evitar que los tubos de muestras oscilen. La hemólisis puede afectar los resultados de la medición. Los ítems que impactan gravemente (aumentan los resultados) son: lactato deshidrogenasa, aspartato aminotransferasa sérica, potasio y hemoglobina séricos son: hierro sérico (?), alanina ácida aminotransferasa sérica (?) y suero; tiroxina (?); levemente afectados (aumentados) son: proteína total, albúmina, fósforo sérico, magnesio sérico, calcio sérico y fosfatasa ácida (4) Deben evitarse Los analitos sensibles a la luz están expuestos a luz artificial o luz solar (UV); Por ejemplo, al medir VA, VB6, betacaroteno, porfirina, bilirrubina, etc., el tubo de muestra debe envolverse en papel de aluminio o material similar para protegerlo.

6. Transporte de muestras: las muestras de sangre completa deben transportarse desde el lugar de recolección de sangre al laboratorio lo antes posible si la distancia de transporte es larga, especialmente debido al impacto en la estabilidad de los analitos. el suero se puede separar en el lugar de extracción de sangre o plasma, si es necesario, y luego enviarse al laboratorio durante el transporte de las muestras; se debe prestar atención al embalaje, los requisitos de temperatura, los métodos de procesamiento, etc. de las muestras para garantizar la calidad. estabilidad de los componentes analizados; los tubos de muestras deben mantenerse cerrados y colocados verticalmente hacia arriba durante el transporte.

7. El laboratorio acepta muestras y prepara muestras centrifugadas: (1) Debe haber registros de la recolección de muestras (la lista de inspección debe verificarse cuidadosamente, las situaciones relevantes deben registrarse cuidadosamente y la recepción y el procesamiento de las muestras deben estar firmado y registrado); (2) Las muestras recibidas deben clasificarse y prepararse para la centrifugación (3) Después de recibir las muestras en el laboratorio, los tubos de muestras aún deben mantenerse herméticamente cerrados, con la boca del tubo hacia arriba, y colocarse; en posición vertical. La pérdida de CO2 en la sangre después de retirar el tapón del tubo provocará un aumento del pH y una disminución del calcio ionizado y de la fosfatasa ácida. En particular, los cambios en el pH afectarán la precisión de algunos resultados de las pruebas. de la muestra debe ser suficiente; agregar anticoagulante Las muestras de sangre se pueden centrifugar inmediatamente; las muestras con acelerador agregado se pueden centrifugar lo antes posible de 5 a 15 minutos después de la extracción de sangre entera anticoagulada (cuando se miden zinc, litio, protoporfirina, etc.) ) no es necesario centrifugar; (5) Refrigeradas (2 ~8oC) Las muestras deben mantenerse a esta temperatura hasta que estén listas para la centrifugación. Se recomienda utilizar una centrífuga con temperatura controlada; (6) No se recomienda utilizar pequeños palos de madera o equipos similares para despegar los coágulos adheridos a la pared del tubo de ensayo y al tapón del tubo antes de centrifugar la muestra. El pelado artificial inducirá hemólisis. . Si es necesario exponer la pared del tubo de ensayo o quitar el tapón del tubo, tenga mucho cuidado y sea gentil.

(2) Etapa de centrifugación

Ese es el periodo de tiempo que el indicador está en la centrífuga.

1. Tiempo de centrifugación y fuerza centrífuga relativa (RCF): al centrifugar muestras de sangre para análisis químicos clínicos, RCF (1000~1200)?g, el tiempo de centrifugación es de 5~10 min.

2. Centrifugación con temperatura controlada: El calor generado durante la centrifugación no favorece la estabilidad de los analitos. Se debe utilizar una centrífuga con temperatura controlada al centrifugar muestras de sangre para análisis químicos clínicos. Algunos analitos que dependen de la temperatura (como la hormona adrenocorticotrópica, el AMP cíclico, las catecolaminas, etc.) deben separarse a 4oC; para los analitos sin requisitos especiales de temperatura, la temperatura de centrifugación debe establecerse entre 20oC y 22oC, y se pueden separar artificialmente temperaturas inferiores a 15oC; El suelo aumentará el valor medido del potasio sérico; las muestras transportadas bajo refrigeración deben centrifugarse a la temperatura requerida.

3. Respecto a la centrifugación: Es mejor completar la centrifugación de la muestra de una vez. Si es necesario volver a centrifugar, el tiempo desde la última centrifugación debe ser muy corto; No se debe volver a centrifugar.