Un gen puede tener más de un AUG en su marco de lectura abierto. Se analiza cómo comienza el proceso de traducción a partir del codón de iniciación AUG.

A medida que el ARNm se mueve de la dirección 5' a 3', hay dos sitios de unión de ARNt-aminoácidos en el ribosoma. Sólo cuando el codón inverso es CAU, el ARNt unido a la metionina puede entrar primero en la posición inicial. Entonces, cuando el ARNm se mueve, el primer AUG es cuando comienza la traducción.

La clave es que la unión del ARNm y los ribosomas comienza desde el extremo 5' del ARNm, no desde ninguna parte del intermedio.