¿Cuáles son las tres formas y principios en que el ARNi inhibe la expresión genética?
¿Inhibición de la transcripción?
El ARNbc y las proteínas relacionadas con el ARNi pueden participar en la modificación de la cromatina, lo que lleva a la metilación de las histonas y del ADN, haciendo que los genes correspondientes no puedan transcribirse, lo que provoca la obstrucción de la expresión génica. Este modo de ARNi que bloquea la función genética y silencia genes a nivel transcripcional se denomina silenciamiento génico transcripcional (TGS). Este fenómeno se demostró por primera vez en plantas, pero aún se debate si existe en mamíferos. En 2004, Svoboda et al. demostraron que en ovocitos de ratón, el silenciamiento prolongado de la expresión del gen diana a través de ARNi no puede causar la metilación de la síntesis de ADN de novo en la región de ADN correspondiente. Morris et al. también concluyeron ese mismo año que el ARNip dirigido a promotores de genes endógenos puede provocar la metilación de las islas CG y la histona H3K9 en su región, inhibiendo así la expresión génica a nivel transcripcional.
Inhibición postranscripcional
El ARNbc de diferentes fuentes se transfiere a plantas, nematodos o células de mamíferos mediante diversas tecnologías transgénicas, se escinde para producir fragmentos de ARNip y luego se escinde el ARNm objetivo. Expresión del gen RISC Block sintético. Este gen se puede transcribir normalmente en ARNm, pero debido a la degradación del ARNm, la función del gen se bloquea. Este modo de ARNi se denomina silenciamiento génico postranscripcional (PTGS). La degradación del ARNm diana por el ARNip es específica de la secuencia y sólo puede provocar la degradación del ARNm homólogo. Si hay una falta de coincidencia de bases entre el ARNip y el ARNm, la eficacia del ARNi se reducirá considerablemente. Si hay una discrepancia de cuatro pb entre el ARNip y el ARNm, no se puede producir ARNi.
¿Supresión de traducción?
Al estudiar el ARNi, Grishok et al. descubrieron que en las células existe un pequeño ARN monocatenario (ssRNA) endógeno, y su longitud también está entre 21 y 25 nt. Este ssRNA puede unirse específicamente a la región 3' no traducida (3'UTR) del ARNm, inhibiendo así la traducción del ARNm y la síntesis de las proteínas funcionales correspondientes. Este pequeño fragmento de ssRNA se llama stRNA (small time RNA). El ARN ss se forma porque cuando el tamaño del ARN es de 70 a 80 nt, es fácil formar una estructura de tallo-bucle de doble hebra. La longitud del tallo de doble hebra es exactamente entre 21 y 25 nt, por lo que esta doble hebra. La estructura es fácilmente reconocida por la enzima Dicer y escindida en ARNt, inhibiendo así la traducción. De esta forma, el ARNi también actúa sobre el ARNm formado tras la transcripción, desempeñando un papel importante en la regulación de la expresión genética y el autodesarrollo en las células biológicas.