Principios de la electroforesis en gel sds-page

El principio de la electroforesis en gel SDS-PAGE es que el gel de poliacrilamida está compuesto de acrilamida y un agente reticulante N, N'-metilen bisacrilamida en el catalizador persulfato de amonio, N, N, N bajo la acción de ',N'tetrametiletilendiamina, un gel con una estructura tridimensional en red que se forma mediante polimerización y reticulación, y se utiliza como soporte para electroforesis.

La tecnología de electroforesis en gel SDS-PAGE fue establecida por primera vez por Shapiro en 1967. Su principio: el gel de poliacrilamida está compuesto de acrilamida y el agente reticulante N, N'monometileno bisacrilamida bajo la acción del catalizador de amonio. persulfato y N, N, N', N' tetrametiletilendiamina, el gel se polimeriza y se reticula para formar un gel con una estructura tridimensional de red y se utiliza como soporte para electroforesis.

Dado que SDS-PAGE puede intentar eliminar o reducir el factor de diferencia de carga de proteína durante la electroforesis a un nivel insignificante, a menudo se utiliza para identificar el grado de purificación de las muestras de separación de proteínas si la muestra de proteína. Se puede identificar si es muy pura y contiene solo una proteína con estructura terciaria o una proteína con estructura cuaternaria que contiene subunidades del mismo peso molecular, entonces solo aparecerá una banda de proteína después de SDS-PAGE. SDS-PAGE se puede dividir en sistema continuo y discontinuo con forma de disco y con forma de placa vertical.

Características de la electroforesis en gel SDS-PAGE

1. A una determinada concentración, el gel es transparente, elástico y tiene buenas propiedades mecánicas.

2. Propiedades químicas estables, sin reacción química con las sustancias separadas e insoluble en muchos disolventes.

3. Estable a los cambios de pH y temperatura.

4. Casi no hay efecto de adsorción ni electroósmosis. Siempre que la pureza del Acr sea alta y las condiciones de operación sean consistentes, la repetibilidad de la separación de la muestra será buena.

5. La muestra no es fácil de esparcir, la dosis es pequeña y su sensibilidad puede alcanzar 10-6ug.

6. El tamaño de los poros del gel se puede ajustar. Seleccione la concentración adecuada según el peso molecular de la sustancia separada y ajuste el tamaño de los poros del gel cambiando la concentración de monómeros y agentes reticulantes.

7. Alta resolución, especialmente en electroforesis en gel discontinua, integrando efectos de concentración, tamiz molecular y carga. Por lo tanto, tiene mayor resolución que la electroforesis en película de acetato de celulosa, la electroforesis en agarosa, etc.

Referencia del contenido anterior: Enciclopedia Baidu-Electroforesis en gel de poliacrilamida SDS