Fórmula de cálculo de PCR
Fórmula de cálculo relacionada con la PCR de secundaria:
La PCR (reacción en cadena de la polimerasa) de secundaria es una técnica de biología molecular comúnmente utilizada para amplificar fragmentos de ADN. En el proceso de PCR, están involucradas algunas fórmulas de cálculo importantes. Las siguientes son tres fórmulas de cálculo comunes:
1. Calcule la longitud del fragmento de ADN objetivo amplificado por PCR: El fragmento de ADN objetivo amplificado por PCR. La longitud se puede calcular mediante la siguiente fórmula: longitud del fragmento objetivo = 2^n* kbp. donde n representa el número de ciclos de PCR y kbp representa la longitud de la plantilla de ADN inicial. Esta fórmula se basa en el principio de la PCR. Cada ciclo duplica el número de fragmentos diana, por lo que la potencia exponencial del número de ciclos determina la longitud del fragmento de ADN diana amplificado.
2. Calcular la concentración de cebadores en el sistema de reacción de PCR:
La concentración de cebadores en el sistema de reacción de PCR tiene un impacto importante en el efecto de amplificación. Normalmente, la concentración del cebador debe estar entre 0,1 y 1 μM. La concentración del cebador se puede calcular mediante la siguiente fórmula: Concentración del cebador (μM) = (cantidad de cebador (g)/peso molecular del cebador (g/mol)) / volumen (L). La cantidad de cebador se puede calcular en función del número de moles necesarios y el peso molecular del cebador.
3. Calcule el valor de pH óptimo del tampón en el sistema de reacción de PCR. El valor de pH del tampón en el sistema de reacción de PCR es muy importante para el efecto y la especificidad de la reacción. se puede calcular mediante la siguiente fórmula:
Valor de pH óptimo = pKa +log([A-]/[HA]) donde pKa es la constante de disociación ácida de la solución tampón, [A-] y [ HA] son la concentración de ácido y álcali. Esta fórmula describe la relación del equilibrio ácido-base para determinar la proporción de concentraciones de ácido a base para condiciones óptimas de pH.
Las anteriores son tres fórmulas de cálculo comunes relacionadas con el PCR de la escuela secundaria. Estas fórmulas pueden ayudar a los investigadores a diseñar y optimizar las condiciones experimentales para obtener mejores resultados de amplificación por PCR. Al mismo tiempo, comprender estas fórmulas de cálculo también le ayudará a comprender los principios y métodos de funcionamiento de la tecnología PCR.