El tumor es una enfermedad crónica progresiva que pone en grave peligro la salud. Se caracteriza por un crecimiento rápido, alta metástasis, baja tasa de curación y fácil recurrencia. En las últimas décadas, a pesar de la mejora y el desarrollo continuos de la resección quirúrgica, la quimioterapia, la radioterapia y otros métodos de tratamiento, el tratamiento eficaz de los tumores sigue siendo un problema. En los últimos años, la inmunoterapia tumoral ha abierto nuevas vías para el tratamiento de tumores. Sin embargo, el mayor obstáculo para la inmunoterapia es la inmunosupresión tumoral. Especialmente el microambiente tumoral con fuerte inmunosupresión. Las células tumorales y las células inmunitarias que se infiltran en el tumor, los nuevos vasos sanguíneos y sus células endoteliales (bec), los fibroblastos asociados a tumores (CAF) y la matriz extracelular son todos isomorfos en el microambiente tumoral. Una de las funciones principales del microambiente tumoral es formar un entorno inmunosupresor dentro del tumor y debilitar el efecto letal de las células inmunitarias sobre las células tumorales. Por ejemplo, la acumulación de una gran cantidad de células T reguladoras (Tregs) y células supresoras derivadas de mieloides (MDSC), la producción de diversas citoquinas inhibidoras y la formación de células T de agotamiento local en el tumor. Estos permiten que las células tumorales evadan el efecto letal del sistema inmunológico, lo que en última instancia conduce al escape inmunológico de las células tumorales. Por lo tanto, los mecanismos moleculares de la inmunosupresión en el microambiente tumoral se conocen bien y TIM-3 es un miembro de la familia de moléculas que contienen dominios de inmunoglobulina y mucina (TIM) de células T. La TIM-3 humana es una proteína de membrana de tipo I compuesta por 301 aminoácidos. Consiste en un extremo N-terminal del dominio V similar a Ig (rico en cisteína), un dominio de mucina rico en serina y treonina, un dominio transmembrana y un dominio intracelular. TIM-3 se expresa en células Th1 auxiliares, Th17 y células T CD8. Es una molécula reguladora negativa que actúa sobre su ligando galectina-9. Recientemente, la molécula TIM-3 ha sido considerada como uno de los marcadores de superficie de las células T agotadas y desempeña un papel importante en el microambiente tumoral. Por lo tanto, la primera parte de este artículo toma TIM-3 y el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) como punto de entrada. Estudiar el agotamiento de las células T en el microambiente tumoral y su impacto en los tumores. La inmunoterapia tumoral puede restaurar el efecto letal de las células inmunitarias sobre las células tumorales al cambiar el microambiente del tumor. La segunda parte de este artículo toma como objeto de investigación la interleucina 33 (IL-33). Revelar sus efectos antitumorales en el microambiente tumoral. IL-33 pertenece a la familia de citocinas interleucina 1 (IL-1). Se expresa constitutivamente en algunas células epiteliales y endoteliales que forman la primera línea de defensa de nuestro organismo. Además, se expresa en algunas células necróticas y células inmunes activadas. Por ejemplo, cuando los macrófagos están infectados por factores exógenos, aunque se ha demostrado que la IL-33 induce respuestas inmunitarias Th2, su papel en las respuestas inmunitarias Th1 sigue sin estar claro. Nuestro estudio reciente encontró que el receptor ST2 de IL-33 se expresa en las células T CD8 efectoras y está regulado por T-bet, y la IL-33 puede mejorar la función de las células T CD8 efectoras. Por tanto, la IL-33 tiene posibles efectos antitumorales. La segunda parte de este artículo explora preliminarmente el efecto antitumoral de la IL-33 in vivo. Este artículo se divide en dos partes: (1) Al analizar la expresión y función de TIM-3 en el cáncer de pulmón de células no pequeñas, entendemos el agotamiento de los linfocitos T en el microambiente tumoral y el mecanismo inmunosupresor del microambiente tumoral. (2) Utilizando IL-33 como herramienta, podemos estudiar cómo cambiar el microambiente del tumor. Proporcionar medios potenciales para la inmunoterapia tumoral. Parte 1: El papel de las moléculas TIM-3 en el microambiente tumoral del cáncer de pulmón de células no pequeñas humano [Propósito] Utilizando moléculas TIM-3 como punto de entrada, estudiar el papel de las Tregs, los linfocitos T agotados y su microambiente inhibidor en humanos Tumores de cáncer de pulmón de células no pequeñas Efectos del microambiente sobre los tumores. [Métodos] Resección quirúrgica de tumores y tejido adyacente en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas, digestión con colagenasa IV y digestión mecánica. Se obtuvieron suspensiones de células individuales y se utilizó centrifugación en gradiente de densidad para separar los linfocitos que se infiltraban en el tejido y los linfocitos en la sangre periférica del paciente. Se utilizó citometría de flujo para detectar la expresión de Tim-3 en linfocitos T y se analizó la correlación entre TIM-3 y factores clínico-patológicos. Se utilizó tinción intracelular para analizar las diferencias funcionales entre las células T agotadas caracterizadas por TIM-3 y las células T normales.
[Resultados] En comparación con los linfocitos infiltrantes de tejido normal (TIL) y las células T adyacentes de sangre periférica, la expresión de TIM-3 en la superficie de los TIL en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas aumentó significativamente. TIM-3 y PD-1 se expresan en CD4 til y CD8 til. Además, la expresión de TIM-3 en células T CD4 infiltrantes de tumores en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas está relacionada con la metástasis en los ganglios linfáticos del tumor y el estadio del paciente. En comparación con los TIL TIM-3-CD4 y TIM-3-CD8, los TIL TIM-3 CD4 y TIM-3 CD8 habían reducido significativamente la secreción de interferón gamma (IFN-γ). También encontramos que en los tejidos tumorales, aproximadamente el 70% de TIM-3 CD4 expresaba FOXP3 y aproximadamente el 60% de foxp 3 CD4 expresaba TIM-3. [Conclusión] Este estudio encontró que TIM-3 se expresa altamente en los TIL del cáncer de pulmón de células no pequeñas, y su expresión en las células T CD4 está relacionada con la metástasis en los ganglios linfáticos y el estadio del paciente. TIM-3 y PD 65438.
3 Treg), permitiéndonos comprender mejor el microambiente tumoral y proporcionando nuevas dianas para la inmunoterapia. Parte 2: IL-33 potencia la respuesta inmune de tipo TH1 en el microambiente tumoral y su efecto antitumoral [Objetivo] Estudiar el impacto de la citocina IL-33 en el microambiente tumoral y su efecto antitumoral. [Método] El vector de expresión recombinante IL-33/pCDNA3.1 secretado se clonó y construyó in vitro. Se transfectó la línea celular de melanoma B16 (B16-IL-33) y se transfirieron el vector vacío pCDNA3.1 (B16-mock) e IL-12/PC DNA 3.1 (b 16-IL-12) respectivamente como controles. Se inocularon por vía subcutánea células tumorales B16-IL-12 y B16-IL33 en ratones C57B/L6, se observó la curva de crecimiento tumoral y se aislaron los linfocitos infiltrantes de tumores. Se utilizó citometría de flujo para detectar indicadores inmunes relevantes. Se inocularon por vía subcutánea 2 x 105B16-células tumorales simuladas y B16-IL33 en ratones normales C57B/L6 (WT) o con factor de transcripción T-bet y gen eomes knockout (DKO), se observó la curva de crecimiento tumoral y se detectaron linfocitos infiltrantes de tumores. aislado. [Resultados] La tasa de crecimiento de los tumores B16-IL-33 en ratones C57B/L6 se ralentizó significativamente. En comparación con el pseudotumor b 16, los tumores B16-IL-33 estaban infiltrados con células T CD45 y CD8, y la proporción de células NK aumentó significativamente.
Las células y células NK tienen una mayor capacidad para secretar la citocina IFN-γ. En ratones que carecían de los factores de transcripción T-bet y Eomes, la tasa de crecimiento de los tumores B16-IL-33 aumentó significativamente y hubo un aumento significativo en el tejido tumoral en comparación con los ratones de tipo salvaje (WT) inoculados con B16-IL. -33 células tumorales. Infiltración de CD45 y CD8. Y se reduce la capacidad de secretar la citocina IFN-γ. [Conclusión] La IL-33 mejora significativamente la respuesta inmune Th1 en el microambiente tumoral, tiene posibles efectos antitumorales y proporciona un nuevo método para la inmunoterapia tumoral.