¿Qué significa ori?
ori es el sitio de origen de la replicación de los plásmidos de genes procarióticos. Es una secuencia de repetición directa compuesta por cuatro 19 pb altamente conservados. Sólo los plásmidos que pueden ser reconocidos por la proteína de replicación de la célula huésped pueden replicarse en esa célula. Copiar.
El origen de la replicación consiste en el replicón inicial (ORI) y sus elementos reguladores. ORI es el sitio donde comienza la replicación del ADN. Cuando la presencia de plásmidos en las células se vuelve necesaria para la supervivencia, el ORI puede mejorar la estabilidad. de los plásmidos, por ejemplo, si un plásmido contiene un gen de resistencia, el número de copias del plásmido aumentará cuando su antibiótico correspondiente esté presente en el medio ambiente.
Existe una gran cantidad de ORI. Dado que generalmente utilizamos plásmidos en bacterias, actualmente los científicos están prestando más atención a los replicones que se encuentran en las bacterias y menos a las células eucariotas y a los virus. Los replicones comunes incluyen COE1, DMB1, DSC101, R6K y 15A. Diferentes orígenes de replicación pueden dar lugar a diferentes números de copias de plásmidos.
Método de selección de ORI
La elección de ORI depende del número de copias de plásmido que necesitamos, en qué host pretendemos usarlo y si debemos considerar la compatibilidad de múltiples copias diferentes. plásmidos. En términos generales, los plásmidos que contienen el mismo ORI son incompatibles porque compiten por la misma maquinaria de replicación, lo que resulta en un entorno intracelular inestable e impredecible. Los plásmidos de diferentes cepas no se pueden transformar directamente, por lo que si se necesitan dos plásmidos en el experimento, asegúrese de que sus ORI sean compatibles.