ZiplocTraducción
Deje que todos los reactivos reposen a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos antes de abrirlos.
Todos los estándares y muestras deben replicarse dentro de la operación.
1. Consulte el Diseño del tablero de verificación para determinar cuántos orificios usar para colocar los orificios.
Regrese el resto del medicamento con desecante a la bolsa de papel de aluminio para sellarla. ¡La tienda no es muy buena! c.
2. Pipetee 100 | L de tampón de detección en el pocillo s0 (0 bonificación/ml estándar).
3. Pipeta 100 |l estándar #1 #7 es un pozo adecuado.
4. Utilice una pipeta para transferir 100 |l de muestra al pocillo correspondiente.
5. Toca el panel para mezclar suavemente el contenido.
6. ¡Sella la placa e incuba durante 1 hora 37! c.
7. Vaciar el pocillo y enjuagar bien. Añadir 400 | l de solución limpiadora a cada pocillo.
Repetir lavado 6 veces, una** tiene 7 cepillos. Después de la limpieza final, vaciado o aspirado.
Agarra firmemente el cartón con papel sin pelusa para eliminar los restos de tampón de lavado.
8. Preparar una pipeta de 100 |l para marcar el anticuerpo en cada pocillo excepto el pocillo blanco.
9. Placa de sellado y eclosión 37! Tres, 30 minutos.
10. Vaciar el pocillo y enjuagar bien. Agregue 400 µl de solución de lavado a cada pocillo.
El lavado repetido 8 veces es un cepillo **** 9. Después de limpiar, vaciar o bombear el pozo por última vez, agarre firmemente el tablero con papel sin pelusa para eliminar cualquier residuo de limpieza restante.
Almacenamiento en búfer.
11. Añadir 100 | 1 sustrato Tsingma Bridge a cada pocillo.
12. Incubar a temperatura ambiente y en oscuridad durante 30 minutos.
13.add 100 | l Deja de resolver para cada pocillo.
14. Para los pocillos en blanco, la densidad óptica de lectura es preferentemente de 450 nm.
Corregido a aproximadamente 570 y 590 nanómetros. Si el lector de placas no puede quitar los pocillos en blanco, reste manualmente la densidad óptica promedio de todos los pocillos en blanco.
Leer.
Ejemplo de protocolo de análisis
Dejar todos los reactivos a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos antes de comenzar.
Todos los estándares y muestras deben procesarse por duplicado.
1.Refer se utiliza para determinar el número de pocillos en el diseño de la muestra para su análisis y darle cualquier uso.
Regrese la tira residual con desecante a la bolsa de aluminio y selle el ziploc. ¡Guarde los agujeros no utilizados en 4! C.
2. Pipeta 100 Vierta el tampón de muestra |L utilizado para el análisis en S0 (solución estándar de 0 pg/ml).
3. Pipetee 100 estándares #1|L a #7 en el pocillo apropiado.
4. Pipetee 100 |L de muestra en el pocillo correspondiente.
5. Toca el tablero para mezclar suavemente el contenido.
6. ¡Sella la placa e incuba a 37 grados durante 1 hora! C.
Contenido de 7.7. Vacíe los pocillos y lave agregando solución de lavado 400 a cada pocillo.
Repita el lavado 6 veces, lo que equivale a ** 7 veces. Después del último lavado, escurre o exhala.
Pues golpea el plato con un rollo de toallas de papel sin pelusa para eliminar los restos de tampón de lavado.
Anticuerpos marcados preparados en 8.8. Pipetee 100|L en cada pocillo excepto en el pocillo blanco.
9. ¡Tablero de sellado, trampilla de 37 grados! C 30 minutos.
10. Añadir el contenido del pocillo vacío y lavar a cada pocillo añadiendo 400 |L de solución de lavado.
Repetir lavado 8 veces y a*** 9 veces. Después del enjuague final, escurra o exhale, luego golpee el plato con un rollo de toallas de papel sin pelusa para eliminar cualquier residuo restante del enjuague.
Almacenamiento en búfer.
11|L. Agregar una matriz de 100 TMB será beneficioso para todos.
12. Incubar en la oscuridad a temperatura ambiente durante 30 minutos.
13. Agregar 100 Abortar |L Buena solución para todos.
14. El lector de placas en blanco mira hacia el orificio en blanco y la densidad óptica leída es de 450 nm, lo cual es mejor.
Más precisamente entre 570 y 590 nanómetros. Si no puede eliminar el lector de placas para los pocillos en blanco, reste manualmente la densidad óptica promedio de los pocillos en blanco de todas las lecturas.
Lectura.