Métodos, pasos y principios de extracción de ARN.
Trizol es un reactivo de extracción de ARN total que contiene isotiocianato de guanidinio y otras sustancias, que pueden lisar rápidamente las células e inhibir la actividad de las nucleasas liberadas por las células. Actualmente, el método Trizol se utiliza habitualmente para extraer ARN de tejidos o células.
Principio de acción de Trizol:
El reactivo Trizol puede mantener la integridad del ARN en muestras homogeneizadas o solubilizadas, y puede simultáneamente destruir células y disolver componentes celulares. Después de añadir cloroformo y centrifugar, el lisado se separó en fase acuosa y fase orgánica. El ARN existe en la fase acuosa.
Tras la transferencia de fase acuosa, el ARN se recupera mediante precipitación con isopropanol. Después de eliminar la fase acuosa, se puede usar etanol para precipitar el ADN de la fase intermedia y se puede agregar alcohol isopropílico para precipitar la proteína de la fase orgánica.
Los datos extendidos son diferentes al ADN. Generalmente, el ARN es una molécula monocatenaria y no forma una estructura de doble hélice. Muchos ARN también necesitan formar una determinada estructura secundaria o incluso terciaria mediante el principio de emparejamiento de bases para poder ejercer sus funciones biológicas.
Las reglas de emparejamiento de bases del ARN son básicamente las mismas que las del ADN, pero además del emparejamiento A-U y G-C, G-U también puede emparejarse.
En las células, el ARN se divide principalmente en tres categorías basadas en diferentes estructuras y funciones, a saber, ARNt (ARN de transferencia), ARNr (ARN ribosómico) y ARNm (ARN mensajero). El ARNm es una plantilla para la síntesis de proteínas y su contenido se transcribe del ADN en el núcleo celular. El ARNt es el reconocedor de la secuencia de bases (es decir, el código genético) del ARNm y también es el transportador de aminoácidos. El ARNr es un componente de los ribosomas, el lugar de trabajo de la síntesis de proteínas.
Enciclopedia Baidu-ARN