¿Cuál es el principio de extracción de ARN mediante el método trizol?
Principio de acción de Trizol:
En muestras homogeneizadas o disueltas, el reactivo Trizol puede mantener la integridad del ARN mientras destruye células y lisa componentes celulares. Después de añadir cloroformo y centrifugar, el lisado se separó en una fase acuosa y una fase orgánica. El ARN existe en la fase acuosa.
Tras la transferencia de fase acuosa, el ARN se recupera mediante precipitación con isopropanol. Después de eliminar la fase acuosa, el ADN se puede precipitar de la fase intermedia con etanol y las proteínas se pueden precipitar de la fase orgánica añadiendo alcohol isopropílico.
Información ampliada
El ARN, al igual que el ADN, también es una cadena de polinucleótidos compuesta por varios nucleótidos conectados mediante enlaces fosfodiéster 3′,5′, pero a diferencia del ADN existen una serie de diferencias. .
1. En cuanto a su composición química, el ARN contiene ribosa pero no desoxirribosa. Contiene uracilo pero no timidina. La excepción es que cada molécula de tNA contiene una timina, que se genera a partir de la metilación del uracilo después de la síntesis de la cadena de ARN. Además, como se mencionó anteriormente, una pequeña cantidad de ADN contiene una pequeña cantidad de ribosa, pero estas excepciones individuales no pueden ser. considerado como Esto niega las diferencias en la composición de los dos tipos de ácidos nucleicos.
2. Aunque el concepto de estructura primaria del ARN es el mismo que el del ADN, su unidad estructural básica son los ribonucleótidos y no los desoxirribonucleótidos. Además, algunos ARN tienen secuencias de nucleótidos especiales en sus extremos 5' o 3', y la estructura primaria del ARN no tiene una organización de secuencias tan compleja como la del ADN.
3. La gran mayoría del ARN es una molécula monocatenaria. La única hebra puede plegarse sobre sí misma para formar una estructura en forma de horquilla y tiene las características de una estructura de doble hélice local. de varias estructuras espaciales RAN* **Mismas características. Las reglas de emparejamiento de bases complementarias en la estructura local de doble hélice del ARN son A a U y G a C. Dado que el emparejamiento de bases no puede formarse completamente dentro de la molécula de ARN, su proporción molar de bases A no es igual a U y G no es igual a C. No existe una ley de Chargaff para las proporciones de bases del ADN.