¿Qué hace la electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS?

Principio de funcionamiento La electroforesis en gel de poliacrilamida tiene una estructura de red y tiene un efecto de tamiz molecular. Tiene dos formas. Una es un gel de poliacrilamida no desnaturalizante. La proteína permanece intacta durante la electroforesis. : tamaño, forma y carga de las proteínas.

Bajo la acción de un campo eléctrico, las partículas cargadas pueden migrar en el gel de polipropileno, y su velocidad de migración está relacionada con el tamaño, la configuración y la carga de las partículas cargadas. El dodecilsulfato de sodio (SDS) puede unirse a las proteínas y cambiar la conformación original de la proteína, convirtiéndola en una varilla elíptica larga similar a la forma de un cigarro. La longitud de su eje corto es la misma y el eje largo es proporcional. proporcional al peso molecular.

Introducción al SDS-PGAE

Principio: Mezclar la solución de proteína con SDS (dodecil sulfato de sodio es un surfactante que destruirá la estructura secundaria de la proteína y la desnaturalizará). y recubre la proteína desnaturalizada con una carga negativa constante (aproximadamente una SDS por cada dos aminoácidos) y una forma consistente (tira larga). Sin SDS para alinear las cargas negativas, se pueden producir proteínas con pesos moleculares similares.

Distribuido en diferentes ubicaciones, este método de electroforesis es Native-PAGE. Durante la electroforesis, los pesos moleculares más pequeños tienden a caer más fácilmente, mientras que los pesos moleculares más grandes quedan atrapados cerca del punto de partida. Aunque voltajes más altos pueden acortar el tiempo del experimento, producirán resultados borrosos, por lo que el experimento puede durar varias horas.

Referencia del contenido anterior: Enciclopedia Baidu - SDS-PGAE