¿Qué paso en la clonación de ADN se utiliza más comúnmente la PCR?
La PCR se utiliza ampliamente para clonar fragmentos de ADN diana, lo que se denomina clonación por PCR. ? La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica de biología molecular que se utiliza para amplificar fragmentos de ADN específicos y puede considerarse como una replicación especial in vitro del ADN. La característica más importante de la PCR es que puede aumentar considerablemente una pequeña cantidad de ADN.
El papel de la PCR:
Entonces, siempre que se pueda aislar un poquito de ADN, se puede amplificar y comparar mediante PCR, ya sean fósiles, restos de monumentos históricos. figuras, o Son las manchas de cabello, piel o sangre que dejó el asesino en un caso de asesinato hace décadas. Este es también el poder de las “pruebas de rastreo”.
Esta idea fue propuesta por primera vez por Mullis en Estados Unidos en 1983. El método simple de amplificación de ADN fue inventado por Mullis en 1985, lo que supuso el verdadero nacimiento de la tecnología PCR. En lo que va de 2013, la PCR se ha convertido en la tecnología de tercera generación. Del 65438 al 0976, el científico taiwanés Qian Jiayun descubrió la ADN polimerasa estable Taq e hizo una contribución fundamental al desarrollo de la tecnología PCR.
La PCR se basa en que el ADN se desnaturaliza a 95°C in vitro y se vuelve monocatenario. A bajas temperaturas (normalmente alrededor de 60 °C), los cebadores y las hebras individuales se combinan según el principio de apareamiento de bases complementarias, y luego la temperatura se ajusta a la temperatura de reacción óptima de la ADN polimerasa (aproximadamente 72 °C). La polimerasa se mueve a lo largo del camino desde el fosfato hasta Las hebras complementarias se sintetizan en la dirección del pentasacárido (5'-3').
Un instrumento de PCR basado en polimerasa es en realidad un dispositivo de control de temperatura que puede controlar bien la temperatura de desnaturalización, la temperatura de renaturalización y la temperatura de extensión.